本發(fā)明涉及可用于哺乳動物的治療和/或預防的有機化合物，并且特別地涉及調節(jié)nlrp3抑制的化合物。本發(fā)明提供式i的新穎化合物，其中r1為h、乙酰基、sf5、鹵代、烷基、烷氧基、鹵代烷基、鹵代烷氧基或氰基；r5為h；或者r1和r5以及它們所鍵合的原子形成包含單個o雜原子的4元至6元雜環(huán)，該雜環(huán)任選地經一個或兩個獨立地選自鹵代和烷基的取代基取代，或者r1和r5以及它們所鍵合的原子形成任選地經1至2個獨立地選自鹵代和烷基的取代基取代的4元至6元環(huán)烷基環(huán)；r2為h、鹵代、烷基、烷氧基、烷氧基烷基、鹵代烷基或環(huán)烷基，其中環(huán)烷基任選地經鹵代取代；r3為h或烷基；r4a為任選地經1至3個獨立地選自以下的取代基取代的雜環(huán)：鹵代、烷基、鹵代烷基、羥基烷基、-oh、氧代、-co2h、環(huán)烷基烷基或任選地經鹵代取代的環(huán)烷基，并且r4b為h，或者r4a和r4b以及它們所鍵合的n形成包含1或2個n雜原子的9元雜環(huán)，該雜環(huán)任選地經1或2個獨立地選自烷基、-oh或鹵代的取代基取代；及其藥用鹽。此外，本發(fā)明包括所有外消旋混合物、它們的全部相應對映體和/或光學異構體。

背景技術：

1、nod樣受體(nlr)家族(含pyrin結構域的蛋白3(nlrp3)炎性體)為炎癥過程的組分，并且其異常活性在遺傳性疾患諸如cryopyrin相關的周期性綜合征(caps)和復雜疾病諸如多發(fā)性硬化癥、2型糖尿病、阿爾茨海默病和動脈粥樣硬化中具有致病性。

2、nlrp3是一種細胞內信號分子，可感知許多病原體來源、環(huán)境和宿主來源的因素。活化后，nlrp3與凋亡相關斑點樣蛋白結合，該蛋白含有胱天蛋白酶活化和募集結構域(asc)。然后，asc聚合形成大的聚集體，稱為asc斑點。聚合asc繼而與半胱氨酸蛋白酶胱天蛋白酶-1相互作用，以形成稱為炎性體的絡合物。這導致胱天蛋白酶-1的活化，其裂解促炎癥性細胞因子il-1β和il-18的前體形式(分別稱為pro-il-1β和pro-il-18)，從而活化這些細胞因子。胱天蛋白酶-1還介導一種類型的稱為細胞焦亡的炎癥細胞死亡。asc斑點也可募集并且活化胱天蛋白酶-8，后者可處理pro-il-1β和pro-il-18并且觸發(fā)凋亡細胞死亡。

3、胱天蛋白酶-1將pro-il-1β和pro-il-18裂解為其活性形式，這些活性形式由細胞分泌。活性胱天蛋白酶-1還裂解gasdermin-d以觸發(fā)細胞焦亡。胱天蛋白酶-1也可通過控制焦亡細胞死亡通路來介導警報蛋白分子諸如il-33和高遷移率族蛋白1(hmgb1)的釋放。胱天蛋白酶-1還裂解細胞內il-1r2，導致其降解并且使il-1α釋放。在人體細胞中，胱天蛋白酶-1還可控制il-37的加工和分泌。胱天蛋白酶-1的許多其他底物諸如細胞骨架和糖酵解通路的組分可能導致胱天蛋白酶-1依賴性炎癥。

4、nlrp3依賴性asc斑點釋放到細胞外環(huán)境中，在那里該斑點可活化胱天蛋白酶-1、誘導胱天蛋白酶-1底物的加工并且傳播炎癥。

5、來源于nlrp3炎性體活化的活性細胞因子是炎癥的重要驅動因素，并且與其他細胞因子通路相互作用以形成對感染和損傷的免疫應答。例如，il-1β信號傳導誘導促炎癥性細胞因子il-6和tnf的分泌。il-1β和il-18與il-23協同作用以誘導記憶性cd4?th17細胞和γδt細胞在缺乏t細胞受體參與的情況下產生il-17。il-18和il-12也協同以誘導來自記憶性t細胞和nk細胞產生ifn-γ，驅動th1應答。

6、遺傳性caps疾病muckle-wells綜合征(mws)、家族性寒冷型自身炎癥綜合征(fcas)和新生兒發(fā)作的多系統炎癥性疾病(nomid)由nlrp3的功能獲得型突變引起，因此將nlrp3定義為炎癥過程的關鍵組分。nlrp3也與許多復雜疾病的發(fā)病機理有關，這些疾病特別地包括代謝疾患諸如2型糖尿病、動脈粥樣硬化、肥胖癥和痛風。

7、nlrp3在中樞神經系統疾病中的作用正在顯現，并且肺部疾病也被證明受到nlrp3的影響。nlrp3還被認為在許多中樞神經系統病癥中發(fā)揮作用，包括帕金森病(pd)、阿爾茨海默病(ad)、癡呆、亨廷頓病、腦瘧疾、肺炎球菌腦膜炎引起的腦損傷(walsh等人,naturereviews,15:84-97,2014,和dempsey等人brain.behav.immun.201761:306-316)。nlrp3還被證明在許多肺部疾病中發(fā)揮作用，包括慢性阻塞性肺病(copd)、哮喘(包括類固醇抵抗性哮喘)、石棉肺和矽肺(de?nardo等人,am.j.pathol.,184:42-54,2014和kim等人am?jrespir?crit?care?med.2017?196(3):283-97)。此外，nlrp3在肝病、腎病和衰老的發(fā)展中具有作用。這些關聯中的許多是使用nlrp3-/-小鼠來定義的，但是也有關于這些疾病中nlrp3特異性活化的見解。在2型糖尿病(t2d)中，胰島淀粉樣蛋白多肽在胰腺中的沉積活化nlrp3和il-1β信號傳導，從而導致細胞死亡和炎癥。

8、數種小分子已證明用于抑制nlrp3炎性小體。格列本脲響應于nlrp3而不是nlrc4或nlrp1的活化，在微摩爾濃度下抑制il-1β產生。其他先前表征的弱nlrp3抑制劑包括小白菊內酯、3,4-亞甲二氧基-β-硝基苯乙烯和二甲基亞砜(dmso)，盡管這些藥劑具有有限的效力并且是非特異性的。

9、目前針對nlrp3相關疾病的治療包括靶向il-1的生物藥劑。這些是重組il-1受體拮抗劑阿那白滯素、中和il-1β抗體卡那單抗(canakinumab)和可溶性誘餌il-1受體利納西普(rilonacept)。這些方法已被證明可以成功治療caps，并且這些生物藥劑已用于針對其他il-1β相關疾病的臨床試驗。

10、需要提供具有改善的藥理和/或生理和/或理化特性的化合物，和/或為已知化合物提供有用的替代品的化合物。

技術實現思路

1、本發(fā)明提供式i的新穎化合物，

2、

3、其中

4、r1為h、乙酰基、sf5、鹵代、烷基、烷氧基、鹵代烷基、鹵代烷氧基或氰基；

5、r5為h；

6、或者r1和r5以及它們所鍵合的原子形成包含單個o雜原子的4元至6元雜環(huán)，該雜環(huán)任選地經一個或兩個獨立地選自鹵代和烷基的取代基取代，或者r1和r5以及它們所鍵合的原子形成任選地經1至2個獨立地選自鹵代和烷基的取代基取代的4元至6元環(huán)烷基環(huán)；

7、r2為h、鹵代、烷基、烷氧基、烷氧基烷基、鹵代烷基、環(huán)烷基，其中環(huán)烷基任選地經鹵代取代；

8、r3為h或烷基；

9、r4a為任選地經1至3個獨立地選自以下的取代基取代的雜環(huán)：鹵代、烷基、鹵代烷基、羥基烷基、-oh、氧代、-co2h、環(huán)烷基烷基或任選地經鹵代取代的環(huán)烷基，并且r4b為h，或者

10、r4a和r4b以及它們所鍵合的n形成包含1或2個n雜原子的9元雜環(huán)，所述雜環(huán)任選地經1或2個獨立地選自烷基、-oh或鹵代的取代基取代；

11、及其藥用鹽。

12、術語“乙酰基”表示-c(＝o)ch3基團。

13、術語“烷基”表示具有1至6個碳原子的單價直鏈或支鏈飽和烴基。在一些實施例中，如果沒有另行說明，則烷基包含1個至6個碳原子(c1-6-烷基)或1個至4個碳原子(c1-4-烷基)。c1-6-烷基的實例包括甲基、乙基、丙基、異丙基、正丁基、異丁基、仲丁基、叔丁基和戊基。特別的烷基包括甲基和乙基。

14、術語“烷氧基”表示式-o-r'的基團，其中r'為c1-6-烷基基團。c1-6-烷氧基基團的實例包括甲氧基、乙氧基、正丙氧基、異丙氧基、正丁氧基、異丁氧基和叔丁氧基。

15、術語“環(huán)烷基”表示單環(huán)或多環(huán)飽和或部分不飽和的非芳族烴。在一些實施例中，除非另外描述，否則環(huán)烷基包含3個至8個碳原子、3個至6個碳原子或3個至5個碳原子。在一些實施例中，環(huán)烷基為飽和單環(huán)或多環(huán)烴。環(huán)烷基基團的實例包括環(huán)丙基、環(huán)丁基、環(huán)戊基和環(huán)己基等。

16、術語“環(huán)烷基烷基”表示其中烷基基團的至少一個氫原子已被環(huán)烷基基團代替的烷基基團。環(huán)烷基烷基的實例包括環(huán)丙基甲基、環(huán)丙基乙基、環(huán)丙基丁基、環(huán)丁基丙基、2-環(huán)丙基丁基、環(huán)戊基丁基、環(huán)己基甲基和環(huán)己基乙基。

17、術語“鹵素”、“鹵化物”和“鹵代”在本文中可互換使用并且表示氟、氯、溴或碘。特別的鹵素是氟。

18、術語“鹵代烷基”表示其中c1-6-烷基基團的至少一個氫原子已被相同或不同的鹵素原子替換的c1-6-烷基基團。鹵代烷基的實例包括氟甲基、二氟甲基和三氟甲基。特別的實例為三氟甲基。

19、術語“鹵代烷氧基”表示其中c1-6-烷氧基基團的至少一個氫原子已被相同或不同的鹵素原子替換的c1-6-烷氧基基團。鹵代烷氧基的實例為二氟甲氧基、三氟甲氧基、二氟乙氧基和三氟乙氧基。

20、術語“雜環(huán)”表示4至9個環(huán)原子的單價飽和或部分不飽和的單環(huán)或雙環(huán)體系，其包含1、2或3個選自n、o和s的環(huán)雜原子，剩余的環(huán)原子是碳。單環(huán)飽和雜環(huán)的實例是氮雜環(huán)丁烷基、二氮雜環(huán)庚烷基、吡咯烷基、四氫呋喃基、吡唑烷基、咪唑烷基、噁唑烷基、異噁唑烷基、噻唑烷基、哌啶基、四氫吡喃基、四氫噻喃基、嗎啉基和哌嗪基。多環(huán)飽和雜環(huán)的實例是氮雜螺庚烷基、二氮雜螺庚烷基、氮雜螺辛烷基、二氮雜螺辛烷基、二氮雜螺壬烷基、氧雜氮雜螺辛烷基和氧雜二氮雜螺壬烷基。多環(huán)雜環(huán)的一個具體實例包括六氫吡咯并吡啶基。雜環(huán)的另一個特別的實例為哌啶基。

21、術語“羥基”表示-oh基團。

22、術語“羥基烷基”表示其中烷基基團的至少一個氫原子已被羥基基團代替的烷基基團。羥基烷基的實例包括羥基甲基、羥基乙基、羥基丙基、2-羥基-1-丙基、2-羥基-2-甲基-1-丙基、3-羥基-1-丙基等。羥基烷基的特別的實例為羥基乙基。

23、術語“腈”表示-c≡n基團。

24、術語“藥用鹽”是指保留游離堿或游離酸的生物效果和性質的那些鹽，這些鹽在生物學或其他方面不是不合需要的。這些鹽用無機酸諸如三氟乙酸、鹽酸、氫溴酸、硫酸、硝酸、磷酸(特別是鹽酸)和有機酸諸如甲酸、乙酸、丙酸、乙醇酸、丙酮酸、草酸、馬來酸、丙二酸、琥珀酸、富馬酸、酒石酸、檸檬酸、苯甲酸、肉桂酸、扁桃酸、甲磺酸、乙磺酸、對甲苯磺酸、水楊酸、n-乙酰基半胱氨酸形成。另外，這些鹽可通過將無機堿或有機堿加入游離酸中來制備。衍生自無機堿的鹽包括但不限于鈉、鉀、鋰、銨、鈣、鎂鹽。衍生自有機堿的鹽包括但不限于以下物質的鹽：伯胺、仲胺和叔胺，包括天然存在的取代胺的取代胺，環(huán)胺和堿性離子交換樹脂，如異丙胺、三甲胺、二乙胺、三乙胺、三丙胺、乙醇胺、賴氨酸、精氨酸、n-乙基哌啶、哌啶、多胺樹脂。式i化合物也可以兩性離子的形式存在。特別優(yōu)選的式i化合物的藥用鹽是與甲酸形成的鹽和與鹽酸形成的鹽，產生鹽酸鹽、二鹽酸鹽或三鹽酸鹽。

25、縮寫um意指微摩爾，并且與符號μm等同。

26、縮寫ul意指微升，并且與符號μl等同。

27、縮寫ug意指微克，并且與符號μg等同。

28、式i化合物可以含有若干不對稱中心，并且可以以光學純對映體、對映體的混合物(例如外消旋體)、光學純非對映體、非對映體的混合物、非對映外消旋體或非對映外消旋體的混合物存在。

29、根據cahn-ingold-prelog規(guī)范，不對稱碳原子可以是"r"或"s"構型。

30、本發(fā)明的另一實施例提供如本文所述的根據式i的化合物及其藥用鹽或酯，特別是如本文所述的根據式i的化合物及其藥用鹽，更特別地是如本文所述的根據式i的化合物。

31、本發(fā)明的實施例提供了本文所述的根據式i的化合物，其中r1為鹵代、鹵代烷基或鹵代烷氧基并且r5為h；或者r1和r5以及它們所鍵合的原子形成包含單個o雜原子的4元至6元雜環(huán)，該雜環(huán)任選地經一個或兩個獨立地選自鹵代和烷基的取代基取代，或者r1和r5以及它們所鍵合的原子形成任選地經1至2個獨立地選自鹵代和烷基的取代基取代的4元至6元環(huán)烷基環(huán)。

32、本發(fā)明的實施例提供了本文所述的根據式i的化合物，其中r1為鹵代、鹵代烷基或鹵代烷氧基并且r5為h；或者r1和r5以及它們所鍵合的原子形成包含單個o雜原子的5元雜環(huán)，或者r1和r5以及它們所鍵合的原子形成5元環(huán)烷基環(huán)。

33、本發(fā)明的實施例提供了本文所述的根據式i的化合物，其中r1為鹵代、鹵代烷基或鹵代烷氧基。

34、本發(fā)明的實施例提供了本文所述的根據式i的化合物，其中r1為鹵代烷基。

35、本發(fā)明的實施例提供了本文所述的根據式i的化合物，其中r5為h，或者r1和r5以及它們所鍵合的原子形成包含單個o雜原子的5元雜環(huán)，或者r1和r5以及它們所鍵合的原子形成5元環(huán)烷基環(huán)。

36、本發(fā)明的實施例提供了本文所述的根據式i的化合物，其中r5為h。

37、本發(fā)明的實施例提供如本文所述的根據式i的化合物，其中r2為h或烷基。

38、本發(fā)明的一個實施例提供如本文所述的根據式i化合物，其中r2為烷基。

39、本發(fā)明的一個實施例提供如本文所述的根據式i化合物，其中r3為烷基。

40、本發(fā)明的實施例提供了本文所述的根據式i的化合物，其中r4a為經烷基、羥基烷基、環(huán)烷基烷基或任選地經鹵代取代的環(huán)烷基取代的6元雜環(huán)，并且r4b為h，或者r4a和r4b與它們所鍵合的n形成任選地經烷基或鹵代取代的包含1或2個n雜原子的9元雜環(huán)。

41、本發(fā)明的實施例提供了本文所述的根據式i的化合物，其中r4a為經烷基、環(huán)烷基烷基或任選地經鹵代取代的環(huán)烷基取代的6元雜環(huán)，并且r4b為h，或者r4a和r4b與它們所鍵合的n形成任選地經烷基或鹵代取代的包含1或2個n雜原子的9元雜環(huán)。

42、本發(fā)明的實施例提供了本文所述的根據式i的化合物，其中r4a為經烷基或羥基烷基取代的包含單個n雜原子的6元雜環(huán)，并且r4b為h，或者r4a和r4b與它們所鍵合的n形成任選地經烷基取代的包含1或2個n雜原子的9元雜環(huán)。

43、本發(fā)明的實施例提供了本文所述的根據式i的化合物，其中r4a為經烷基取代的包含單個n雜原子的6元雜環(huán)，并且r4b為h，或者r4a和r4b與它們所鍵合的n形成任選地經烷基取代的包含1或2個n雜原子的9元雜環(huán)。

44、本發(fā)明的實施例提供了本文所述的根據式i的化合物，其中r4a為經烷基取代的包含單個n雜原子的6元雜環(huán)，并且r4b為h，或者r4a和r4b與它們所鍵合的n形成包含2個n雜原子的9元雜環(huán)，其中包含2個n雜原子的9元雜環(huán)經烷基取代。

45、本發(fā)明的實施例提供了本文所述的根據式i的化合物，其中r4a為乙基哌啶基并且r4b為h。

46、本發(fā)明的一個實施例提供如本文所述的根據式i的化合物，其中

47、r1為鹵代、鹵代烷基或鹵代烷氧基；

48、r5為h；

49、或者r1和r5以及它們所鍵合的原子形成包含單個o雜原子的5元雜環(huán)，或者r1和r5以及它們所鍵合的原子形成5元環(huán)烷基環(huán)；

50、r2為h、鹵代、烷基、鹵代烷基、環(huán)烷基，其中環(huán)烷基任選地經鹵代取代；

51、r3為烷基；

52、r4a為經以下項取代的6元雜環(huán)：烷基、羥基烷基、環(huán)烷基烷基或任選地經鹵代取代的環(huán)烷基，并且r4b為h，或者

53、r4a和r4b以及它們所鍵合的n形成任選地經烷基或鹵代取代的包含1或2個n雜原子的9元雜環(huán)；

54、及其藥用鹽。

55、本發(fā)明的一個實施例提供如本文所述的根據式i的化合物，其中

56、r1為鹵代、鹵代烷基或鹵代烷氧基；

57、r5為h；

58、或者r1和r5以及它們所鍵合的原子形成包含單個o雜原子的5元雜環(huán)，或者r1和r5以及它們所鍵合的原子形成5元環(huán)烷基環(huán)；

59、r2為h、鹵代、烷基、鹵代烷基、環(huán)烷基，其中環(huán)烷基任選地經鹵代取代；

60、r3為烷基；

61、r4a為經烷基、環(huán)烷基烷基或任選地經鹵代取代的環(huán)烷基取代的6元雜環(huán)，并且r4b為h，或者

62、r4a和r4b以及它們所鍵合的n形成任選地經烷基或鹵代取代的包含1或2個n雜原子的9元雜環(huán)；

63、及其藥用鹽。

64、本發(fā)明的一個實施例提供如本文所述的根據式i的化合物，其中

65、r1為鹵代、鹵代烷基或鹵代烷氧基；

66、r5為h；

67、或者r1和r5以及它們所鍵合的原子形成包含單個o雜原子的5元雜環(huán)，或者r1和r5以及它們所鍵合的原子形成5元環(huán)烷基環(huán)；

68、r2為h或烷基；

69、r3為烷基；

70、r4a為經烷基或羥基烷基取代的包含單個n雜原子的6元雜環(huán)，并且r4b為h，或者

71、r4a和r4b以及它們所鍵合的n形成任選地經烷基取代的包含1或2個n雜原子的9元雜環(huán)；

72、及其藥用鹽。

73、本發(fā)明的一個實施例提供如本文所述的根據式i的化合物，其中

74、r1為鹵代、鹵代烷基或鹵代烷氧基；

75、r5為h；

76、或者r1和r5以及它們所鍵合的原子形成包含單個o雜原子的5元雜環(huán)，或者r1和r5以及它們所鍵合的原子形成5元環(huán)烷基環(huán)；

77、r2為h或烷基；

78、r3為烷基；

79、r4a為經烷基或羥基烷基取代的包含單個n雜原子的6元雜環(huán)，并且r4b為h，或者

80、r4a和r4b以及它們所鍵合的n形成任選地經烷基取代的包含1或2個n雜原子的9元雜環(huán)；

81、及其藥用鹽。

82、本發(fā)明的一個實施例提供如本文所述的根據式i的化合物，其中

83、r1為鹵代、鹵代烷基或鹵代烷氧基；

84、r5為h；

85、或者r1和r5以及它們所鍵合的原子形成包含單個o雜原子的5元雜環(huán)，或者r1和r5以及它們所鍵合的原子形成5元環(huán)烷基環(huán)；

86、r2為烷基；

87、r3為烷基；

88、r4a為經烷基或羥基烷基取代的包含單個n雜原子的6元雜環(huán)，并且r4b為h，或者

89、r4a和r4b以及它們所鍵合的n形成任選地經烷基取代的包含1或2個n雜原子的9元雜環(huán)；

90、及其藥用鹽。

91、本發(fā)明的一個實施例提供如本文所述的根據式i的化合物，其中

92、r1為鹵代、鹵代烷基或鹵代烷氧基；

93、r5為h；

94、或者r1和r5以及它們所鍵合的原子形成包含單個o雜原子的5元雜環(huán)，或者r1和r5以及它們所鍵合的原子形成5元環(huán)烷基環(huán)；

95、r2為h或烷基；

96、r3為烷基；

97、r4a為經烷基取代的包含單個n雜原子的6元雜環(huán)，并且r4b為h，或者

98、r4a和r4b以及它們所鍵合的n形成任選地經烷基取代的包含1或2個n雜原子的9元雜環(huán)；

99、及其藥用鹽。

100、本發(fā)明的一個實施例提供如本文所述的根據式i的化合物，其中

101、r1為鹵代、鹵代烷基或鹵代烷氧基；

102、r5為h；

103、或者r1和r5以及它們所鍵合的原子形成包含單個o雜原子的5元雜環(huán)，或者r1和r5以及它們所鍵合的原子形成5元環(huán)烷基環(huán)；

104、r2為烷基；

105、r3為烷基；

106、r4a為經烷基取代的包含單個n雜原子的6元雜環(huán)，并且r4b為h，或者

107、r4a和r4b以及它們所鍵合的n形成任選地經烷基取代的包含1或2個n雜原子的9元雜環(huán)；

108、及其藥用鹽。

109、本發(fā)明的一個實施例提供如本文所述的根據式i的化合物，其中

110、r1為鹵代、鹵代烷基或鹵代烷氧基；

111、r5為h；

112、或者r1和r5以及它們所鍵合的原子形成包含單個o雜原子的5元雜環(huán)，或者r1和r5以及它們所鍵合的原子形成5元環(huán)烷基環(huán)；

113、r2為h或烷基；

114、r3為烷基；

115、r4a為經烷基或羥基烷基取代的包含單個n雜原子的6元雜環(huán)，并且r4b為h，或者

116、r4a和r4b以及它們所鍵合的n形成包含2個n雜原子的9元雜環(huán)，其中包含2個n雜原子的9元雜環(huán)經烷基取代；

117、及其藥用鹽。

118、本發(fā)明的一個實施例提供如本文所述的根據式i的化合物，其中

119、r1為鹵代、鹵代烷基或鹵代烷氧基；

120、r5為h；

121、或者r1和r5以及它們所鍵合的原子形成包含單個o雜原子的5元雜環(huán)，或者r1和r5以及它們所鍵合的原子形成5元環(huán)烷基環(huán)；

122、r2為烷基；

123、r3為烷基；

124、r4a為經烷基或羥基烷基取代的包含單個n雜原子的6元雜環(huán)，并且r4b為h，或者

125、r4a和r4b以及它們所鍵合的n形成包含2個n雜原子的9元雜環(huán)，其中包含2個n雜原子的所述9元雜環(huán)經烷基取代；

126、及其藥用鹽。

127、本發(fā)明的一個實施例提供如本文所述的根據式i的化合物，其中

128、r1為鹵代、鹵代烷基或鹵代烷氧基；

129、r5為h；

130、或者r1和r5以及它們所鍵合的原子形成包含單個o雜原子的5元雜環(huán)，或者r1和r5以及它們所鍵合的原子形成5元環(huán)烷基環(huán)；

131、r2為h或烷基；

132、r3為烷基；

133、r4a為經烷基取代的包含單個n雜原子的6元雜環(huán)，并且r4b為h，或者

134、r4a和r4b以及它們所鍵合的n形成包含2個n雜原子的9元雜環(huán)，其中包含2個n雜原子的所述9元雜環(huán)經烷基取代；

135、及其藥用鹽。

136、本發(fā)明的一個實施例提供如本文所述的根據式i的化合物，其中

137、r1為鹵代、鹵代烷基或鹵代烷氧基；

138、r5為h；

139、或者r1和r5以及它們所鍵合的原子形成包含單個o雜原子的5元雜環(huán)，或者r1和r5以及它們所鍵合的原子形成5元環(huán)烷基環(huán)；

140、r2為烷基；

141、r3為烷基；

142、r4a為經烷基取代的包含單個n雜原子的6元雜環(huán)，并且r4b為h，或者

143、r4a和r4b以及它們所鍵合的n形成包含2個n雜原子的9元雜環(huán)，其中包含2個n雜原子的所述9元雜環(huán)經烷基取代；

144、及其藥用鹽。

145、本發(fā)明的一個實施例提供如本文所述的根據式i的化合物，其中

146、r1為鹵代烷基；

147、r5為h；

148、r2為h或烷基；

149、r3為烷基；

150、r4a為乙基哌啶基并且r4b為h；

151、及其藥用鹽。

152、本發(fā)明的一個實施例提供如本文所述的根據式i的化合物，其中

153、r1為鹵代烷基；

154、r5為h；

155、r2為烷基；

156、r3為烷基；

157、r4a為乙基哌啶基并且r4b為h；

158、及其藥用鹽。

159、如本文所述的式i化合物的特別的實例選自

160、3-[[(3r)-1-乙基-3-哌啶基]氨基]-6-[2-羥基-4-(三氟甲基)苯基]-4-甲基-1,2,4-三嗪-5-酮；

161、3-[[(3r)-1-乙基-3-哌啶基]氨基]-6-[2-羥基-6-甲基-4-(三氟甲基)苯基]-4-甲基-1,2,4-三嗪-5-酮；

162、及其藥用鹽。

163、如本文所述的式i化合物的其他特定實例選自

164、3-[[(3r)-1-乙基-3-哌啶基]氨基]-6-(4-羥基-6-甲基-茚滿-5-基)-4-甲基-1,2,4-三嗪-5-酮；

165、3-[[(3r)-1-(2-羥基乙基)-3-哌啶基]氨基]-6-(4-羥基-6-甲基-茚滿-5-基)-4-甲基-1,2,4-三嗪-5-酮；

166、3-[[(3r)-1-乙基-3-哌啶基]氨基]-6-(4-羥基-6-甲基-2,3-二氫苯并呋喃-5-基)-4-甲基-1,2,4-三嗪-5-酮；

167、6-(4-氯-2-羥基-6-甲基-苯基)-3-[[(3r)-1-乙基-3-哌啶基]氨基]-4-甲基-1,2,4-三嗪-5-酮；

168、及其藥用鹽。

169、本文所述的式i化合物的優(yōu)選實例為3-[[(3r)-1-乙基-3-哌啶基]氨基]-6-[2-羥基-6-甲基-4-(三氟甲基)苯基]-4-甲基-1,2,4-三嗪-5-酮及其藥用鹽。

170、如本文所述的式i化合物的其他優(yōu)選實例選自

171、3-[[(3r)-1-乙基-3-哌啶基]氨基]-6-(4-羥基-6-甲基-茚滿-5-基)-4-甲基-1,2,4-三嗪-5-酮；

172、3-[[(3r)-1-乙基-3-哌啶基]氨基]-6-(4-羥基-6-甲基-2,3-二氫苯并呋喃-5-基)-4-甲基-1,2,4-三嗪-5-酮；

173、及其藥用鹽。

174、制造如本文所述的式i化合物的方法是本發(fā)明的目的。

175、本發(fā)明的式i化合物及其藥用鹽可以通過本領域中已知的方法，例如通過下述方法制備，該方法包括使式iii化合物反應以通過保護基團(pg)裂解來提供式i化合物。優(yōu)選地，保護基團為甲基醚。優(yōu)選地，用二氯甲烷中的三溴化硼(bbr3)裂解甲基醚。

176、

177、一般合成方案

178、通式i的化合物可按照方案1按照下述方法變化形式制備。起始材料是可商業(yè)獲得的或可以根據已知方法制備。

179、方案1：通式i的化合物的一般合成(gp＝保護基團)

180、

181、通式ii的化合物是在中間體1和具有方案1中所示的通式的硼酸或酯的存在下，在本領域技術人員熟知的條件下使用鈀介導的suzuki-miyaura交叉偶聯反應獲得的。隨后，為了制備通式iii的化合物，在吡啶的存在下，在加熱下，用通式hnr4br4a的合適的仲胺進行親核芳香取代(snar)，其中r4a和r4b具有本發(fā)明權利要求中給出的含義。或者，反應也可以在微波輻射下進行。最后，需要保護基團裂解的最后一步。在甲基醚保護基團的情況下，通常用二氯甲烷中的三溴化硼(bbr3)裂解，得到通式i的化合物。

182、方案2：中間體1的合成

183、

184、中間體1按照實驗部分所述的通過sandmeyer型反應合成，使用市售的6-氨基-4-甲基-3-甲基硫烷基-1,2,4-三嗪-5-酮(cas#89730-72-3)，在60℃在乙腈中，在氯化亞銅(i)和氯化鋰存在下進行。

185、本發(fā)明的另一實施例提供一種含有本發(fā)明化合物和治療惰性載體、稀釋劑或賦形劑的藥物組合物或藥物，以及使用本發(fā)明化合物來制備此類組合物和藥物的方法。在一個實例中，式i化合物可通過在環(huán)境溫度在適當的ph和期望的純度下與生理學上可接受的載體(即在所用劑量和濃度下對接受者無毒的載體)混合而配制為蓋倫(galenical)施用形式。配制物的ph主要取決于化合物的具體用途和濃度，但優(yōu)選地在約3至約8的范圍內。在一個實例中，將式i化合物在ph?5的乙酸鹽緩沖液中配制。在另一實施例中，式i化合物為無菌的。化合物可以例如作為固體或無定形組合物、作為凍干配制物或作為水溶液儲存。

186、以與良好醫(yī)學實踐一致的方式配制、計量和施用組合物。在這種情況下需要考慮的因素包括所治療的特定疾患、所治療的特定哺乳動物、個體患者的臨床病癥、疾患的原因、藥劑的遞送部位、施用方法、施用的時間安排，以及執(zhí)業(yè)醫(yī)師已知的其他因素。

187、本發(fā)明的化合物可通過任何適合的方式施用，包括口服、局部(包括頰和舌下)、直腸、陰道、經皮、腸胃外、皮下、腹膜內、肺內、皮內、鞘內和硬膜外和鼻內，以及(如果需要用于局部治療)病灶內施用。腸胃外輸注包括肌內、靜脈內、動脈內、腹膜內或皮下施用。

188、本發(fā)明化合物可以任何方便的施用形式施用，例如，片劑、粉劑、膠囊劑、溶液劑、分散劑、混懸劑、糖漿劑、噴霧劑、栓劑、凝膠劑、乳劑、貼劑等。此類組合物可以包含藥物制劑中常規(guī)的組分，例如，稀釋劑、載體、ph調節(jié)劑、甜味劑、填充劑和其他活性劑。

189、通過混合本發(fā)明的化合物和載體或賦形劑來制備通常的配制物。適合的載體和賦形劑為本領域技術人員熟知的，并且在例如ansel,howard?c.等人，ansel’spharmaceutical?dosage?forms?and?drug?delivery?systems.philadelphia:lippincott,williams和wilkins,2004；gennaro,alfonso?r.等人remington:the?scienceand?practice?of?pharmacy.philadelphia:lippincott,williams和wilkins,2000；以及rowe,raymond?c.handbook?of?pharmaceutical?excipients.chicago,pharmaceuticalpress,2005中有詳細描述。配制物還可以包含一種或多種緩沖劑、穩(wěn)定劑、表面活性劑、潤濕劑、潤滑劑、乳化劑、懸浮劑、防腐劑、抗氧化劑、不透明劑、助流劑、加工助劑、著色劑、甜味劑、加香劑、調味劑、稀釋劑和其他已知的添加劑，以提供美觀的藥物(例如，本發(fā)明的化合物或其藥物組合物)展示或有助于藥物產品(例如，藥物)的制備。

190、式i化合物及其藥用鹽可與藥學上惰性的無機或有機助劑一起加工，以用于生產片劑、包衣片劑、糖衣丸、硬明膠膠囊、注射液或局部制劑。例如，可使用乳糖、玉米淀粉或其衍生物、滑石粉、硬脂酸或其鹽等作為片劑、糖衣丸和硬明膠膠囊的此類助劑。

191、用于軟明膠膠囊的合適的助劑為例如植物油、蠟、脂肪、半固體物質和液體多元醇等。

192、用于制備溶液和糖漿的合適的助劑為例如水、多元醇、蔗糖、轉化糖、葡萄糖等。

193、用于注射液的合適的助劑為例如水、醇、多元醇、甘油、植物油等。

194、用于栓劑的合適的助劑為例如天然或硬化油、蠟、脂肪、半固體或液體多元醇等。

195、用于局部眼用制劑的合適的助劑為例如環(huán)糊精、甘露醇或本領域已知的許多其他載體和賦形劑。

196、此外，藥物制劑可以含有防腐劑、增溶劑、增粘物質、穩(wěn)定劑、潤濕劑、乳化劑、甜味劑、著色劑、香料、用于改變滲透壓的鹽、緩沖劑掩模劑或抗氧化劑。它們還可以含有其他有治療價值的物質。

197、劑量可以在寬范圍內變化，當然將適合每種特定情況下的各種要求。一般而言，在口服施用的情況下，每kg體重約0.1mg至20mg、優(yōu)選地每kg體重約0.5mg至4mg(例如每人約300mg)的日劑量應當是合適的，其優(yōu)選地分為1至3個單獨的劑量(可由例如相同的量組成)。在局部施用的情況下，配制物可包含按重量計0.001％至15％的藥物，并且所需劑量可以為0.1mg至25mg，每天或每周單次施用、或每天多次施用(2至4次)，或每周多次施用。但是，顯而易見的是，當顯示為適用時，可超過本文中給出的上限或下限。

198、本發(fā)明的一實施例是如本文所述的根據式i的化合物，其用作治療活性物質。

199、本發(fā)明的一實施例是如本文所述的根據式i的化合物，其用于治療或預防疾病、疾患或病癥，其中該疾病、疾患或病癥對nlrp3抑制有應答。

200、本發(fā)明的一實施例是如本文所述的根據式i的化合物，其用于治療或預防疾病、疾患或病癥，其中該疾患或病癥對nlrp3抑制有應答。

201、如本文所用，術語“nlrp3抑制”是指nlrp3活性水平的完全或部分降低，并且包括例如抑制活性nlrp3和/或抑制nlrp3的活化。

202、有證據表明nlrp3誘導的il-1和il-18在與多種不同疾患相關或由多種不同疾患引起的炎癥應答中發(fā)揮作用(menu等人,clinical?and?experimental?immunology,166:1-15,2011；strowig等人,nature,481:278-286,2012)。

203、在一個實施例中，疾病、疾患或病癥選自：

204、(i)炎癥；

205、(ii)自身免疫性疾病；

206、(iii)癌癥；

207、(iv)感染；

208、(v)中樞神經系統疾病；

209、(vi)代謝疾病；

210、(vii)心血管疾病；

211、(viii)呼吸道疾病；

212、(ix)肝臟疾病；

213、(x)腎臟疾病；

214、(xi)眼部疾病；

215、(xii)皮膚疾病；

216、(xiii)淋巴病癥；

217、(xiv)心理紊亂；

218、(xv)移植物抗宿主病；

219、(xvi)異常性疼痛；

220、(xvii)與糖尿病相關的病癥；以及

221、(xviii)已確定個體攜帶nlrp3中種系或體細胞非沉默突變的任何疾病

222、在另一個實施例中，疾病、疾患或病癥選自：

223、(i)癌癥；

224、(ii)感染；

225、(iii)中樞神經系統疾病；

226、(iv)心血管疾病；

227、(v)肝臟疾病；

228、(vi)眼部疾病；或

229、(vii)皮膚疾病。

230、在本發(fā)明的再一個典型實施例中，疾病、疾患或病癥是炎癥。可以治療或預防的炎癥的實例包括與以下疾病相關或由以下疾病引起的炎癥應答：

231、(i)皮膚病，諸如接觸性超敏反應、大皰性類天皰瘡、曬傷、牛皮癬、特應性皮炎、接觸性皮炎、過敏性接觸性皮炎、脂溢性皮炎、扁平苔蘚、硬皮病、天皰瘡、大皰性表皮松解癥、蕁麻疹、紅斑或脫發(fā)；

232、(ii)關節(jié)病，諸如骨關節(jié)炎、系統性幼年特發(fā)性關節(jié)炎、成人發(fā)作的斯蒂爾病、復發(fā)性多軟骨炎、類風濕性關節(jié)炎、幼年慢性關節(jié)炎、痛風或血清陰性脊柱關節(jié)病(例如強直性脊柱炎、銀屑病關節(jié)炎或賴特爾病)；

233、(iii)肌肉疾病，諸如多發(fā)性肌炎或重癥肌無力；

234、(iv)胃腸道疾病，諸如炎癥性腸病(包括克羅恩病和潰瘍性結腸炎)、結腸炎、胃潰瘍、乳糜瀉、直腸炎、胰腺炎、嗜酸性胃腸炎、肥大細胞增多癥、抗磷脂綜合征，或可能對腸道以外產生影響的食物相關過敏(例如偏頭痛、鼻炎或濕疹)；

235、(v)呼吸系統疾病，諸如慢性阻塞性肺病(copd)、哮喘(包括嗜酸粒細胞性哮喘、支氣管哮喘、過敏性哮喘、內源性哮喘、外源性哮喘或粉塵性哮喘，且特別是慢性或頑固性哮喘，諸如晚期哮喘和氣道高反應性)、支氣管炎、鼻炎(包括急性鼻炎、過敏性鼻炎、萎縮性鼻炎、慢性鼻炎、干酪性鼻炎、肥厚性鼻炎、膿皰性鼻炎、干燥性鼻炎、藥物性鼻炎、膜性鼻炎、季節(jié)性鼻炎例如花粉熱和血管舒縮性鼻炎)、鼻竇炎、特發(fā)性肺纖維化(ipf)、結節(jié)病、農民肺、矽肺、石棉肺、火山灰引起的炎癥、成人呼吸窘迫綜合征、過敏性肺炎或特發(fā)性間質性肺炎；

236、(vi)血管疾病，諸如動脈粥樣硬化、白塞氏病、血管炎或韋格氏肉芽腫病；

237、(vii)自身免疫性疾病，諸如系統性紅斑狼瘡、干燥綜合征、系統性硬化癥、橋本甲狀腺炎、i型糖尿病、特發(fā)性血小板減少性紫癜或格雷夫斯病；

238、(viii)眼部疾病，諸如葡萄膜炎、過敏性結膜炎或春季結膜炎；

239、(ix)神經疾病，諸如多發(fā)性硬化癥或腦脊髓炎；

240、(x)感染或感染相關疾病，諸如獲得性免疫缺陷綜合征(aids)、急性或慢性細菌感染、急性或慢性寄生蟲感染、急性或慢性病毒感染、急性或慢性真菌感染、腦膜炎、肝炎(甲型、乙型或丙型或其他病毒性肝炎)、腹膜炎、肺炎、會厭炎、瘧疾、登革出血熱、利什曼病、鏈球菌性肌炎、結核分枝桿菌(包括結核分枝桿菌和hiv合并感染)、胞內鳥分枝桿菌、卡氏肺囊蟲肺炎、睪丸炎/附睪炎、軍團菌、萊姆病、甲型流感、eb病毒感染、病毒性腦炎/無菌性腦膜炎或盆腔炎性疾病；

241、(xi)腎臟疾病，諸如系膜增生性腎小球腎炎、腎病綜合征、腎炎、腎小球腎炎、肥胖相關性腎小球病、急性腎衰竭、急性腎損傷、尿毒癥、腎病綜合征、腎纖維化(包括慢性晶體腎病)或腎性高血壓；

242、(xii)淋巴疾病，諸如castleman病；

243、(xiii)免疫系統的疾病或涉及免疫系統的疾病，諸如高ige綜合征、麻風病、家族性噬血細胞性淋巴組織細胞增多癥或移植物抗宿主病；

244、(xiv)肝臟疾病，諸如慢性活動性肝炎、非酒精性脂肪性肝炎(nash)、酒精性肝炎、非酒精性脂肪性肝病(nafld)、酒精性脂肪性肝病(afld)、酒精性脂肪性肝炎(ash)、原發(fā)性膽汁性肝硬化、暴發(fā)性肝炎、肝纖維化或肝功能衰竭；

245、(xv)癌癥，包括上面列出的那些癌癥；

246、(xvi)燒傷、創(chuàng)傷、外傷、出血或卒中；

247、(xvii)輻射暴露；

248、(xviii)代謝性疾病，諸如2型糖尿病(t2d)、動脈粥樣硬化、肥胖、痛風或假性痛風；和/或

249、(xix)疼痛，諸如炎癥性痛覺過敏、盆腔疼痛、異常性疼痛、神經病性疼痛或癌癥引起的骨痛。

250、本發(fā)明的一實施例是如本文所述的根據式i的化合物，其用于治療或預防選自以下的疾病、疾患或病癥：

251、(i)炎癥；

252、(ii)自身免疫性疾病；

253、(iii)癌癥；

254、(iv)感染；

255、(v)中樞神經系統疾病；

256、(vi)代謝疾病；

257、(vii)心血管疾病；

258、(viii)呼吸道疾病；

259、(ix)肝臟疾病；

260、(x)腎臟疾病；

261、(xi)眼部疾病；

262、(xii)皮膚疾病；

263、(xiii)淋巴病癥；

264、(xiv)心理紊亂；

265、(xv)移植物抗宿主病；

266、(xvi)異常性疼痛；

267、(xvii)與糖尿病相關的病癥；以及

268、(xviii)已確定個體攜帶nlrp3中種系或體細胞非沉默突變的任何疾病。

269、本發(fā)明的實施例是本文所述的根據式i的化合物用于治療或預防疾病、疾患或病癥的用途，其中該疾病、疾患或病癥對nlrp3抑制有應答。

270、本發(fā)明的一實施例是如本文所述的根據式i的化合物在治療或預防選自阿爾茨海默病和帕金森病的疾病、疾患或病癥中的用途。

271、本發(fā)明的一實施例是如本文所述的根據式i的化合物用于治療或預防選自哮喘或copd的疾病、疾患或病癥的用途。

272、本發(fā)明的一實施例是如本文所述的根據式i的化合物，其用于治療或預防選自阿爾茨海默病和帕金森病的疾病、疾患或病癥。

273、本發(fā)明的一實施例是如本文所述的根據式i的化合物，其用于治療或預防選自哮喘或copd的疾病、疾患或病癥。

274、本發(fā)明的一實施例是如本文所述的根據式i的化合物用于制備藥物的用途，該藥物用于治療或預防選自阿爾茨海默病和帕金森病的疾病、疾患或病癥。

275、本發(fā)明的一實施例是如本文所述的根據式i的化合物用于制備藥物的用途，該藥物用于治療或預防選自哮喘或copd的疾病、疾患或病癥。

276、本發(fā)明的一實施例是一種治療或預防選自阿爾茨海默病和帕金森病的疾病、疾患或病癥的方法，該方法包括施用有效量的如本文所述的根據式i的化合物。

277、本發(fā)明的一實施例是一種治療或預防選自哮喘或copd的疾病、疾患或病癥的方法，該方法包括施用有效量的如本文所述的根據式i的化合物。

278、本發(fā)明的一實施例涉及一種抑制nlrp3的方法，該方法包括施用有效量的如本文所述的根據式i的化合物。

279、本發(fā)明的又一實施例是如本文所述的式i化合物，其根據所述方法中的任一者進行制造。

280、本發(fā)明的一實施例是一種藥物組合物，其包含如本文所述的根據式i的化合物以及治療惰性載體。

281、測定程序

282、nlrp3和細胞焦亡

283、眾所周知，nlrp3的活化會導致細胞焦亡，并且這一特征在臨床疾病的表現中發(fā)揮著重要作用(yan-gang?liu等人,cell?death&disease,2017,8(2),e2579；alexander?wree等人,hepatology,2014,59(3),898-910；alex?baldwin等人,journal?of?medicinalchemistry,2016,59(5),1691-1710；ema?ozaki等人,journal?of?inflammationresearch,2015,8,15-27；zhen?xie和gang?zhao,neuroimmunology?neuroinflammation,2014,1(2),60-65；mattia?cocco等人,journal?of?medicinal?chemistry,2014,57(24),10366-10382；t.satoh等人,cell?death&disease,2013,4,e644)。因此，預計nlrp3的抑制劑將阻止細胞焦亡以及促炎癥性細胞因子(例如il-1β)從細胞的釋放。

284、thp-1細胞：培養(yǎng)和制備

285、將thp-1細胞(atcc#tib-202)在含有l(wèi)-谷氨酰胺(gibco#11835)并補充有1mm丙酮酸鈉(sigma#s8636)和青霉素(100單位/ml)/鏈霉素(0.1mg/ml)(sigma#p4333)在10％胎牛血清(fbs)(sigma#f0804)的rpmi中生長。細胞按常規(guī)傳代并生長至匯合(約106個細胞/ml)。實驗當天，收獲thp-1細胞并重懸于rpmi培養(yǎng)基(不含fbs)中。然后對細胞進行計數并通過臺盼藍(sigma#t8154)檢查活力(>90％)。進行適當稀釋以得到625,000個細胞/ml的濃度。向該稀釋的細胞溶液中添加lps(sigma#l4524)以得到1μg/ml最終測定濃度(fac)。將40μl最終制劑等分到96孔板的每個孔中。由此制備的板用于化合物篩選。

286、thp-1細胞焦亡測定

287、按照以下方法分步測定進行化合物篩選。

288、1.將含有1.0μg/ml?lps的thp-1細胞(25,000個細胞/孔)接種在40μlrpmi培養(yǎng)基(不含fbs)中，置于涂有聚d-賴氨酸(vwr#734-0317)的96孔、黑壁、透明底部細胞培養(yǎng)板中

289、2.將5μl化合物(8點半對數稀釋，10μm最高劑量)或媒介物(dmso?0.1％?fac)添加到適當的孔中

290、3.在37℃，5％?co2孵育3小時

291、4.將5μl尼日利亞菌素(sigma#n7143)(fac?5μm)添加到所有孔中

292、5.在37℃，5％?co2孵育1小時

293、6.孵育期結束時，以300xg旋轉板3分鐘并除去上清液

294、7.然后添加50μl刃天青(sigma#r7017)(fac?100μm刃天青，溶于不含fbs的rpmi培養(yǎng)基)，并在37℃和5％?co2將板再孵育1-2小時

295、8.在envision讀取器中以ex?560nm和em?590nm讀取板

296、9.ic50數據適合非線性回歸方程(對數抑制劑與響應變量斜率4參數)

297、細胞焦亡測定的結果總結于下表1中，為thp?ic50。

298、人全血il-1β釋放測定

299、對于全身遞送，當化合物存在于血流中時抑制nlrp3的能力非常重要。由于這個原因，根據以下方案研究了人全血中多種化合物的nlrp3抑制活性。

300、鋰肝素管中的人全血取自來自志愿者供體小組的健康供體。

301、1.將80μl含有1μg/ml?lps的全血放入96孔透明底細胞培養(yǎng)板(corning#3585)中

302、2.將10μl化合物(8點半對數稀釋，10μm最高劑量)或媒介物(dmso?0.1％?fac)添加到適當的孔中

303、3.在37℃，5％?co2孵育3小時

304、4.將10μl尼日利亞菌素(sigma#n7143)(10μm?fac)添加到所有孔中

305、5.在37℃，5％?co2孵育1小時

306、6.孵育期結束時，以300xg旋轉板5分鐘以沉淀細胞并除去20μl上清液，且添加到96孔v形底板中進行il-1β分析(注意：含有上清液的這些板可以儲存在-80℃稍后進行分析)

307、7.il-1β根據制造商方案(perkin?elmer-alphalisa?il-1kit?al220f-5000)進行測量

308、8.ic50數據適合非線性回歸方程(對數抑制劑與響應變量斜率4參數)

309、人全血測定的結果總結于下表1中，為hwb?ic50。

310、herg篩選測定

311、在小分子藥物開發(fā)過程中，導致藥物失敗的最常見不良副作用之一是心律失常。這樣的失敗通常與藥物抑制人類ether-à-go-go相關基因(herg)心臟鉀通道的能力有關。因此，對herg心臟鉀通道沒有或具有低抑制被認為是有益的。

312、細胞

313、cho?crelox?herg細胞系(atcc參考編號pta-6812，雌性中國倉鼠細胞)由roche生成并驗證。即用型速凍cho-herg細胞在evotec(germany)冷凍保存，并在實驗中直接使用。

314、實驗溶液

315、細胞外溶液含有(以mm為單位)：nacl?150；kcl?4；cacl2?1；mgcl2?1；hepes10；ph7.2-7.4，含naoh，滲透壓290-330mosm。細胞內溶液含有(以mm為單位)：kcl,10；kf,100；nacl,10；hepes,10；egta,20；ph＝7.0-7.4，含koh，滲透壓260-300mosm。

316、電生理學

317、化合物對herg?k+電流參數的影響將在至少4個細胞中以2種濃度評估。

318、herg實驗使用自動膜片鉗系統384(nanion?technologiesgmbh,germany)進行。在35-37℃，在全細胞配置中使用膜片電壓鉗技術測量k+電流。

319、將細胞保持在-80mv的靜息電壓，并通過圖1中示出的電壓模式(用于在35-37℃引發(fā)向外的k+電流的脈沖模式)刺激細胞以激活herg通道并向外傳導ikherg電流，刺激頻率為0.1hz(6bpm)

320、數據分析

321、記錄每種藥物濃度的ikherg幅度，并將其與溶媒對照值(記為100％)進行比較，以確定部分阻斷。濃度-應答數據用以下關系擬合：

322、

323、濃度-應答曲線使用eworkbook套件(id?business?solutions?ltd,uk)的非線性回歸分析進行擬合。數據擬合采用4參數邏輯模型進行(擬合＝(a+(b/(1+((x/c)^d)))))，其中a＝0并且b＝100)。

324、herg測定的結果總結于下表2中，為herg?ic20。

325、跨細胞p-gp測定：

326、一般測定使用過表達人或小鼠p-gp的轉染llc-pk1細胞(豬腎上皮細胞)，在96孔半透濾膜板上培養(yǎng)，其中它們形成具有緊密連接的極化單層，并充當頂側室和基底區(qū)室之間的屏障。

327、p-gp在單層的頂面膜中表達。

328、分別通過添加細胞不可滲透標記物熒光黃和參考p-gp底物艾多沙班，來確認細胞單層的緊密性和p-gp的功能活性。

329、pampa：

330、pampa(平行人工膜滲透率測定)為候選藥物的一線滲透率篩選。pampa測定使用人工磷脂膜模擬跨細胞吸收條件。該測定確定可用于化合物優(yōu)化和排序目的的滲透性值以及用于預測腸道吸收的計算機模型的輸入參數。

331、在開始時間(參考)時測量供體濃度，并與一定時間后(結束時間)的供體和受體濃度進行比較，以計算化合物通過膜的程度。

332、微粒體穩(wěn)定性：

333、在tecan(tecan?group?ltd,switzerland)自動液體處理系統上，在96孔板中于37℃在微粒體中以1μm的測試化合物(0.5mg/ml)和輔因子nadph進行孵育。在測試化合物與微粒體的10分鐘預孵育步驟后，通過添加輔因子啟動酶促反應。在1、3、6、9、15、25、35和45分鐘時，取出等分的培養(yǎng)物并用含有內標的1:3(v/v)乙腈猝滅。隨后將樣品冷卻并離心，隨后通過lc-ms/ms2分析上清液。

334、肝細胞中的代謝穩(wěn)定性：

335、測定說明：

336、生物材料。獲得冷凍保存的肝細胞[小鼠、大鼠、兔、猴和人(雄性和雌性；混合)]。在整個研究過程中，重建后的肝細胞的活力為至少80％。與基質小鼠成纖維細胞(陰性對照；匯集)的額即用型大鼠/人培養(yǎng)物[長期肝細胞共培養(yǎng)物；匯集(對于人類，男性n＝5，女性n＝5)]與板孵育，需要應用培養(yǎng)基和維持培養(yǎng)基。

337、懸浮肝細胞的代謝。將原代匯集的冷凍保存的肝細胞在含有10％?fcs、0.05mg/ml鏈霉素和50u/ml青霉素以及0.4mm?l-谷氨酰胺；以及0.01mg/ml慶大霉素、0.048mg/ml氫化可的松和0.004mg/ml胰島素的預熱william’s?e培養(yǎng)基中重建，最終懸浮密度為1×106個細胞/ml。使用配備co2培養(yǎng)箱和定軌搖床的液體處理系統(tecan)全自動地進行培養(yǎng)。向孔(1×105個細胞/孔)中添加測試化合物(例如1μm)后，將96孔肝細胞懸浮培養(yǎng)板在37℃、5％co2中孵育。通過在指定時間點至長達2h向孵育孔中添加乙腈(包括內標)來猝滅樣品。

338、通過的代謝。懸浮液測定中對測試物(以例如1μm，0.1％v/vdmso)的孵育在96孔板中進行，96孔板中含有粘附肝細胞與小鼠成纖維細胞對照細胞的共培養(yǎng)物或單獨的對照細胞(5％?co2氣氛和37℃)。人類中的孵育培養(yǎng)基與懸浮肝細胞中的孵育培養(yǎng)基相同。在規(guī)定的時間點(2、18、26、48、72和96h)，用含有內標物的冰冷乙腈猝滅整個孔。

339、隨后將樣品適當離心，并通過lc-ms/ms分析上清液。孵育以n＝1或2進行。

340、表1：nlrp3抑制活性

341、

342、

343、表2：herg抑制測定

344、

345、現在將通過以下實例說明本發(fā)明，所述實例不具有限制性。

346、如果制備例以對映異構體或非對映異構體的混合物的形式獲得，則純對映異構體或非對映異構體可通過本文所述的方法或本領域的技術人員所知的方法諸如例如手性色譜或結晶來獲得。

347、實驗方法

348、縮寫：

349、

350、

351、實例

352、如果沒有另行說明，則所有實例和中間體在氮氣氣氛下制備。

353、中間體的合成：

354、中間體1

355、6-氯-4-甲基-3-甲基硫烷基-1,2,4-三嗪-5-酮

356、

357、將亞硝酸異戊酯(2.02ml,15.01mmol,2.02eq)逐滴添加到6-氨基-4-甲基-3-甲基硫烷基-1,2,4-三嗪-5-酮(cas#89730-72-3,1.28g,7.43mmol,1.0eq)、芐基三乙基氯化銨(2.54g,11.2mmol,1.5eq)、氯化亞銅(i)(1.47g,14.9mmol,2.0eq)和氯化鋰(472.6mg,11.2mmol,1.5eq)在mecn(30ml)的混合物中，在60℃加熱2小時。將反應混合物冷卻，用tbme(50ml)稀釋并過濾通過硅藻土。將濾液用水(50ml)洗滌、干燥(mgso4)、過濾并在真空下濃縮。利用硅膠色譜(40g柱，0-50％?etoac/異己烷)純化殘余物，以得到標題化合物(570mg,39％)，其為白色固體。lcms:m/z?192.3/194.0[m+h]+,esi?pos。

358、實例的合成

359、實例1：

360、3-[[(3r)-1-乙基-3-哌啶基]氨基]-6-[2-羥基-4-(三氟甲基)苯基]-4-甲基-1,2,4-三嗪-5-酮；甲酸

361、

362、步驟a：6-[2-甲氧基-4-(三氟甲基)苯基]-4-甲基-3-甲基硫烷基-1,2,4-三嗪-5-酮

363、向6-氯-4-甲基-3-甲基硫烷基-1,2,4-三嗪-5-酮中間體1(500mg,2.48mmol,1.0eq)、2-甲氧基-4-(三氟甲基)-苯基硼酸(670mg,3.02mmol,1.22eq)和xphos?pd?g3(215mg,0.25mmol,0.1eq)于1,4-二氧六環(huán)(5ml)的攪拌溶液中添加碳酸鈉(飽和水溶液)(0.5ml,7.44mmol,3.0eq)。用n2將混合物脫氣三次，并將反應混合物在100℃攪拌6小時，隨后在室溫靜置過夜。將反應混合物用水(15ml)和etoac(40ml)稀釋。使各層分離，并且將水層用etoac(2×15ml)萃取。將合并的有機層干燥(na2so4)、過濾并濃縮至干。將粗品通過快速柱色譜法在硅膠上純化(24g柱，0％至100％?tbme/異己烷)，以得到標題化合物(411mg,45％)，其為淺黃色固體。lcmsm/z?332.0[m+h]+esi?pos。

364、步驟b：3-[[(3r)-1-乙基-3-哌啶基]氨基]-6-[2-甲氧基-4-(三氟甲基)苯基]-4-甲基-1,2,4-三嗪-5-酮

365、將6-[2-甲氧基-4-(三氟甲基)苯基]-4-甲基-3-甲基硫烷基-1,2,4-三嗪-5-酮(步驟a)(278mg,0.76mmol,1.0eq)和(3r)-1-乙基哌啶-3-胺(610mg,4.76mmol,6.3eq)于吡啶(2ml)中的溶液在90℃加熱72小時。將反應混合物冷卻并用dcm(50ml)和水(10ml)稀釋。分離各層并將有機層用鹽水(3×10ml)洗滌、干燥(na2so4)、過濾并濃縮至干。然后將粗品通過快速柱色譜法在硅膠上純化(24g柱，dcm上樣，0％至10％?meoh(0.7m?nh3)/dcm)，以得到標題化合物(212mg,61％)，其為稠的棕色油。lcmsm/z?412.2[m+h]+esi?pos。

366、步驟c：3-[[(3r)-1-乙基-3-哌啶基]氨基]-6-[2-羥基-4-(三氟甲基)苯基]-4-甲基-1,2,4-三嗪-5-酮；甲酸

367、在0℃，將三溴化硼溶液(2.9ml,2.90mmol,在dcm中1m，5.01eq)逐滴添加到3-[[(3r)-1-乙基-3-哌啶基]氨基]-6-[2-甲氧基-4-(三氟甲基)苯基]-4-甲基-1,2,4-三嗪-5-酮(步驟b)(238mg,0.58mmol,1.0eq)于dcm(8ml)的溶液中。將反應混合物攪拌30分鐘，并隨后用0.7m?nh3?meoh(10ml)淬滅，并在室溫攪拌30分鐘。將反應混合物在減壓下濃縮。將粗產物溶解在dmso(8ml)中，過濾，并通過反相制備型hplc(gilson)純化，使用phenomenexgemini?nc-c18制備柱，5μm，30mm?x?150mm，流速42ml?min-1，用水中0.1％甲酸-mecn梯度洗脫15分鐘。柱上稀釋泵提供5ml?min-1mecn?1.2分鐘。梯度信息：0.0-1.0分鐘,90％?mecn；1.0-11.0分鐘，從90％?mecn均勻變化到65％?mecn；11.1至14.0分鐘，從65％mecn均勻變化到100％?mecn；14.1–15.0分鐘，從100％平衡至90％?mecn。將澄清級分在genevac中蒸發(fā)，以得到標題化合物(142mg，54％收率)，其為黃色固體。lcmsm/z?398.4[m+h]+esipos。

368、實例2：

369、3-[[(3r)-1-乙基-3-哌啶基]氨基]-6-[2-羥基-6-甲基-4-(三氟甲基)苯基]-4-甲基-1,2,4-三嗪-5-酮

370、

371、步驟a：6-[2-甲氧基-6-甲基-4-(三氟甲基)苯基]-4-甲基-3-甲基硫烷基-1,2,4-三嗪-5-酮

372、向6-氯-4-甲基-3-甲基硫烷基-1,2,4-三嗪-5-酮中間體1(300mg,1.49mmol,1.0eq)、[2-甲氧基-6-甲基-4-(三氟甲基)苯基]硼酸(423.4mg,1.81mmol,1.22eq)和xphospd?g3(129.0mg,0.15mmol,0.1eq)在1,4-二氧六環(huán)(3ml)中的攪拌溶液添加碳酸鈉(飽和水溶液)(0.3ml)。將混合物用n2脫氣三次，并在n2下在90℃攪拌12小時。添加水(15ml)和etoac(40ml)。使各層分離，并且將水層用etoac(2×15ml)萃取。將合并的有機層干燥(na2so4)、過濾并濃縮至干。將產物通過快速柱色譜法在硅膠上純化(24g柱，0-60％?tbme/異己烷)，以得到標題化合物(87.0mg,16％)，其為淺黃色膠狀物。

373、lcmsm/z?346.23[m+h]+esi?pos。

374、步驟b：3-[[(3r)-1-乙基-3-哌啶基]氨基]-6-[2-羥基-6-甲基-4-(三氟甲基)苯基]-4-甲基-1,2,4-三嗪-5-酮

375、將6-[2-甲氧基-6-甲基-4-(三氟甲基)苯基]-4-甲基-3-甲基硫烷基-1,2,4-三嗪-5-酮(80.0mg,0.23mmol,1.0eq)和(3r)-1-乙基哌啶-3-胺二鹽酸鹽(293.5mg,1.46mmol,6.3eq)于吡啶(2ml)中的溶液在90℃加熱4天。將反應混合物冷卻至室溫，添加dcm(50ml)和水(10ml)。分離各層并將有機層用鹽水(3×10ml)洗滌、用na2so4干燥、過濾并濃縮至干。然后將粗中間體通過快速柱色譜法在硅膠上純化(24g柱，0-10％?meoh(0.7mnh3)/dcm)上的快速柱層析純化，以得到棕色固體(21.0mg)。將棕色固體溶解在冷卻至0℃的dcm(2ml)中，并添加三溴化硼(于dcm中1m)(1.16ml,1.16mmol,5.0eq)，并隨后允許升溫至室溫并攪拌18h。在0℃將反應混合物添加到0.7m?nh3于meoh(10ml)中的攪拌溶液中，允許反應混合物升溫至室溫過夜并隨后濃縮。將棕色殘余物溶解在dcm(25ml)和水(10ml)中，分層，并將有機層干燥(mgso4)并濃縮至干。將產物通過色譜法在硅膠上純化(12g柱，0-10％meoh(0.7m?nh3)/dcm)，以得到標題化合物(7.0mg,7％)，其為淺棕色固體。lcmsm/z412.24[m+h]+esi?pos。

376、中間體2

377、6-碘-4-甲基-3-甲基硫烷基-1,2,4-三嗪-5-酮

378、

379、將亞硝酸異戊酯(320.0μl,2.38mmol,2.05eq)逐滴添加到6-氨基-4-甲基-3-甲基硫烷基-1,2,4-三嗪-5-酮(cas#89730-72-3；200.0mg,1.16mmol,1.0eq)、叔丁基碘化銨(648.0mg,1.75mmol,1.51eq)、碘化亞銅(447.0mg,2.35mmol,2.02eq)和碘化鋰(330.0mg,2.47mmol,2.12eq)在mecn(4ml)的混合物中，在60℃加熱3h。將反應混合物冷卻，用etoac(50ml)稀釋并過濾通過硅藻土，用etoac(2x?50ml)沖洗。將濾液用水(100ml)稀釋并將分離的水相進一步用etoac(2×50ml)萃取。基昂合并的有機層干燥(na2so4)、過濾并蒸發(fā)，以得到粗制產物。通過色譜法在硅膠上純化殘余物(40g柱，0-100％etoac/異己烷)，以得到標題化合物(156.0mg,46％收率)，其為黃色固體。lcms:m/z?284.0[m+h]+,esi?pos。

380、中間體3：

381、2-(4-芐基氧基-6-甲基-茚滿-5-基)-4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼雜環(huán)戊烷

382、

383、步驟a：5-溴-6-甲基-茚滿-4-醇

384、在0℃，將水(5ml)中的亞硝酸鈉(200.0mg,2.9mmol,1.3eq)逐滴添加到硫酸(10.0ml,20.0mmol,9.0eq)中的5-溴-6-甲基-茚滿-4-胺(500.0mg,2.21mmol,1.0eq,cas#2411531-03-6)(thf中2m)。將反應攪拌約30分鐘，隨后在約30分鐘內恢復至室溫。然后在50℃，將反應混合物逐滴添加至硫酸(10.0ml,20.0mmol,9.0eq)(thf中2m)的攪拌溶液中并將反應再攪拌2.5h。允許反應冷卻至室溫，隨后用水(100ml)和etoac(100ml)稀釋。分離各層并將水相用etoac(2x?50ml)再次萃取。合并的有機層用鹽水(1x?50ml)洗滌，用mgso4干燥并真空濃縮。將粗品通過柱色譜法在硅膠上純化(0-20％?etoac/異己烷)，以得到標題化合物(211.3mg,42％收率)，其為灰白色固體。1h?nmr(500mhz,dmso)δ9.13(br?s,1h),6.70(s,1h),2.80(t,2h),2.76(t,2h),2.27(s,3h),1.97(p,2h)。

385、步驟b：4-芐基氧基-5-溴-6-甲基茚烷

386、將碳酸鉀(185.0mg,1.34mmol,2.0eq)添加到5-溴-6-甲基-茚滿-4-醇(150.0mg,0.66mmol,1.0eq)在丙酮(5ml)中的攪拌溶液中并將反應在室溫攪拌5分鐘。隨后逐滴添加芐基溴(0.1ml,0.84mmol,1.27eq)并將反應再攪拌約36小時。將反應混合物真空濃縮，隨后溶解在dcm(30ml)和水(30ml)中。分離有機層，并用dcm(2x?30ml)再次萃取水層。合并的有機層用鹽水(1x?30ml)洗滌，用mgso4干燥并真空濃縮。將粗品通過柱色譜法在硅膠上純化(0-10％?etoac/異己烷)，以得到標題化合物(191.3mg,90％收率)，其為淺黃色油。1h?nmr(500mhz,dmso)δ7.54–7.48(m,2h),7.44–7.38(m,2h),7.38–7.32(m,1h),7.01(s,1h),4.95(s,2h),2.89(t,2h),2.80(t,2h),2.33(s,3h),2.06–1.95(m,2h)。

387、步驟c：2-(4-芐基氧基-6-甲基-茚滿-5-基)-4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼雜環(huán)戊烷

388、在-78℃，將正丁基鋰(己烷中1.6m)(4.41ml,7.06mmol,1.6eq)逐滴添加到4-芐基氧基-5-溴-6-甲基-茚烷(1.4g,4.41mmol,1.0eq)和2-異丙氧基-4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼雜環(huán)戊烷(1.35ml,6.62mmol,1.5eq)于thf(20ml)的攪拌溶液中，并將反應攪拌3小時。通過緩慢添加飽和nh4cl水溶液(20ml)來猝滅反應。允許混合物在18小時內溫熱至室溫。分離各層，并用etoac(2x?20ml)萃取水層，然后將合并的有機層真空濃縮。將粗產物通過硅膠色譜法純化(0-5％(庚烷/etoac))，以提供標題化合物(975.0mg，60％產率)，其為淺棕色固體。1h?nmr(500mhz,dmso)δ7.48–7.42(m,2h),7.41–7.35(m,2h),7.35–7.30(m,1h),6.81(s,1h),4.91(s,2h),2.83(dt,4h),2.25(s,3h),1.97(p,2h),1.22(s,12h)。

389、實例3：

390、3-[[(3r)-1-乙基-3-哌啶基]氨基]-6-(4-羥基-6-甲基-茚滿-5-基)-4-甲基-1,2,4-三嗪-5-酮

391、

392、步驟a：6-(4-芐基氧基-6-甲基-茚滿-5-基)-4-甲基-3-甲基硫烷基-1,2,4-三嗪-5-酮

393、將2-(4-芐基氧基-6-甲基-茚滿-5-基)-4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼雜環(huán)戊烷中間體3(322.0mg,0.88mmol,1.11eq)、6-碘-4-甲基-3-甲基硫烷基-1,2,4-三嗪-5-酮中間體2(225.0mg,0.79mmol,1.0eq)、k2co3(352.0mg,2.55mmol,3.2eq)和pd-170(111.0mg,0.16mmol,0.21eq)在mecn(12ml)和水(4ml)中的混合物用n2脫氣5分鐘，隨后加熱至60℃持續(xù)21小時。通過針頭將n2的緩流添加到反應混合物中以盡量限制dimes副產物的形成。將反應冷卻、濃縮并加載到硅藻土上。將粗產物通過柱色譜法在c18硅膠上純化(40g柱，10-100％[0.1％甲酸mecn:0.1％甲酸水溶液]，以得到標題化合物(86.0mg,24％收率)，其為黃色固體。lcmsm/z?394.2[m+h]+esipos。

394、步驟b：6-(4-芐基氧基-6-甲基-茚滿-5-基)-4-甲基-3-[[(3r)-1-芐基-3-哌啶基]氨基]-1,2,4-三嗪-5-酮；甲酸鹽

395、將6-(4-芐基氧基-6-甲基-茚滿-5-基)-4-甲基-3-甲基硫烷基-1,2,4-三嗪-5-酮(70.0mg,0.18mmol,1.0eq)添加到mw小瓶中并添加(r)-3-氨基-1-芐基哌啶(170.0mg,0.89mmol,5.02eq；cas#168466-84-0)。隨后將混合物在180℃輻射2小時。將反應冷卻至室溫，將所得濃稠黑色殘留物用dcm溶解并加載到硅藻土上。將粗產物通過反相柱色譜法在c18硅膠上純化(26g柱，10-100％[0.1％甲酸mecn:0.1％甲酸水溶液])，以得到標題化合物(35.0mg，36％收率)，其為淺棕色固體，以及另一部分標題化合物(18.0mg，17％收率)，其為深棕色固體。lcmsm/z?536.4[m+h]+esipos。

396、步驟c：3-[[(3r)-1-乙基-3-哌啶基]氨基]-6-(4-羥基-6-甲基-茚滿-5-基)-4-甲基-1,2,4-三嗪-5-酮

397、將pd/c(39型)(32.0mg,0.02mmol,0.25eq)和pd/c(87型)(16.0mg,0.02mmol,0.25eq)添加到6-(4-芐基氧基-6-甲基-茚滿-5-基)-4-甲基-3-[[(3r)-1-芐基-3-哌啶基]氨基]-1,2,4-三嗪-5-酮；甲酸鹽(35.0mg,0.1mmol,1.0eq)于乙腈(2.1ml)中的攪拌溶液中。在室溫，將氫化容器置于氫氣氣氛(2巴)下并劇烈攪拌4小時。將反應過濾通過硅藻土塞、用etoh沖洗并濃縮至干，以得到粗產物。將粗產物通過柱色譜法在硅膠上純化(24g柱，0-10％?meoh(0.7mnh3)/dcm)，冷凍干燥后得到標題化合物(20.0mg，85％收率)，其為淺黃色冷凍干燥固體。lcmsm/z?384.3[m+h]+esipos。

398、實例4：

399、3-[[(3r)-1-(2-羥基乙基)-3-哌啶基]氨基]-6-(4-羥基-6-甲基-茚滿-5-基)-4-甲基-1,2,4-三嗪-5-酮

400、

401、步驟a：6-(4-羥基-6-甲基-茚滿-5-基)-4-甲基-3-[[(3r)-3-哌啶基]氨基]-1,2,4-三嗪-5-酮

402、將pd/c(39型)(20.0mg,0.01mmol,0.29eq)和pd/c(87型)(10.0mg,0.01mmol,0.29eq)添加到6-(4-芐基氧基-6-甲基-茚滿-5-基)-4-甲基-3-[[(3r)-1-芐基-3-哌啶基]氨基]-1,2,4-三嗪-5-酮；甲酸鹽實例3步驟b(19.0mg,0.03mmol,1.0eq)于1,4-二氧六環(huán)(3ml)中的攪拌溶液中。在室溫，將氫化容器置于氫氣氣氛(2巴)下并劇烈攪拌18小時。添加額外的pd/c(39型)(20.0mg,0.01mmol,0.29eq)和pd/c(87型)(10.0mg,0.01mmol,0.29eq)，并將反應再次置于該條件24小時。將反應過濾通過硅藻土塞、用etoh沖洗并濃縮至干，以得到標題化合物(7mg，42％收率)，其不經進一步純化即用于下一步驟。lcmsm/z?356.3[m+h]+esipos。

403、步驟b：3-[[(3r)-1-(2-羥基乙基)-3-哌啶基]氨基]-6-(4-羥基-6-甲基-茚滿-5-基)-4-甲基-1,2,4-三嗪-5-酮

404、在室溫，將dmf(0.100ml)中的2-碘乙醇(3.39mg,0.02mmol,1.0eq)逐滴添加至6-(4-羥基-6-甲基-茚滿-5-基)-4-甲基-3-[[(3r)-3-哌啶基]氨基]-1,2,4-三嗪-5-酮(7.0mg,0.02mmol,1.0eq)和dipea(5.15ul,0.03mmol,1.5eq)于dmf(0.30ml)的攪拌溶液中，并將反應混合物攪拌3天。將反應混合物濃縮至干，隨后裝載到硅藻土上。隨后將粗品通過反相快速柱色譜法純化(c18?13g柱，10-100％?mecn/10mm?nh4hco3水溶液)，冷凍干燥后得到標題化合物(2.0mg，24％收率)，其為灰白色固體。lcmsm/z?400.5[m+h]+esi?pos。

405、實例5：

406、3-[[(3r)-1-乙基-3-哌啶基]氨基]-6-(4-羥基-6-甲基-2,3-二氫苯并呋喃-5-基)-4-甲基-1,2,4-三嗪-5-酮

407、

408、步驟a：6-(4-芐基氧基-6-甲基-2,3-二氫苯并呋喃-5-基)-4-甲基-3-甲基硫烷基-1,2,4-三嗪-5-酮

409、將2-(4-芐基氧基-6-甲基-2,3-二氫苯并呋喃-5-基)-4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼雜環(huán)戊烷(217.0mg,0.59mmol,1.12eq,cas#2923540-53-6)、6-碘-4-甲基-3-甲基硫烷基-1,2,4-三嗪-5-酮中間體2(150.0mg,0.53mmol,1.0eq)、k2co3(220.0mg,1.59mmol,3.0eq)和pd-170(71.0mg,0.11mmol,0.2eq)在mecn(10ml)和水(2ml)中的混合物用n2脫氣5分鐘，隨后加熱至60℃持續(xù)2小時。通過針頭將n2的緩流添加到反應混合物中以盡量限制dimes副產物的形成。將反應攪拌約4天。將反應冷卻、濃縮并加載到硅藻土上。將粗產物通過柱色譜法在c18硅膠上純化(40g柱，10-100％[0.1％甲酸mecn:0.1％甲酸水溶液]，以得到標題化合物(36.0mg,17％收率)，其為黃色固體。lcmsm/z?395.8[m+h]+esipos。

410、步驟b：6-(4-芐基氧基-6-甲基-2,3-二氫苯并呋喃-5-基)-4-甲基-3-[[(3r)-1-芐基-3-哌啶基]氨基]-1,2,4-三嗪-5-酮；甲酸鹽

411、將6-(4-芐基氧基-6-甲基-2,3-二氫苯并呋喃-5-基)-4-甲基-3-甲基硫烷基-1,2,4-三嗪-5-酮(35.0mg,0.09mmol,1.0eq)添加到mw小瓶中并添加(r)-3-氨基-1-芐基哌啶(160.0mg,0.84mmol,9.5eq；cas#168466-84-0)。隨后將混合物在180℃輻射1小時。將反應冷卻至室溫，將所得濃稠黑色殘留物用dcm溶解并加載到硅藻土上。將粗產物通過反相柱色譜法在c18硅膠上純化(26g柱，10-100％[0.1％甲酸mecn:0.1％甲酸水溶液]，以得到標題化合物(30.0mg,54％收率)，其為棕色固體。lcmsm/z?538.4[m+h]+esipos。

412、步驟c：3-[[(3r)-1-乙基-3-哌啶基]氨基]-6-(4-羥基-6-甲基-2,3-二氫苯并呋喃-5-基)-4-甲基-1,2,4-三嗪-5-酮

413、將pd/c(39型)(24.0mg,0.01mmol,0.26eq)和pd/c(87型)(12.0mg,0.01mmol,0.26eq)添加到6-(4-芐基氧基-6-甲基-2,3-二氫苯并呋喃-5-基)-4-甲基-3-[[(3r)-1-芐基-3-哌啶基]氨基]-1,2,4-三嗪-5-酮；甲酸鹽(30.0mg,0.04mmol,1.0eq)于乙腈(3.0ml)中的攪拌溶液中。在室溫，將氫化容器置于氫氣氣氛(2巴)下并劇烈攪拌18小時。將反應過濾通過硅藻土塞、用etoh沖洗并濃縮至干，以得到粗產物(14mg)。將粗產物通過柱色譜法在硅膠上純化(12g柱，0-10％?meoh(0.7m?nh3)/dcm)，冷凍干燥后得到標題化合物(8.0mg，47％收率)，其為淺黃色冷凍干燥固體。lcmsm/z?386.2[m+h]+esipos。

414、實例6：

415、6-(4-氯-2-羥基-6-甲基-苯基)-3-[[(3r)-1-乙基-3-哌啶基]氨基]-4-甲基-1,2,4-三嗪-5-酮

416、

417、步驟a：6-(4-氯-2-羥基-6-甲基-苯基)-4-甲基-3-甲基硫烷基-1,2,4-三嗪-5-酮

418、將(4-氯-2-羥基-6-甲基-苯基)硼酸(200.0mg,1.07mmol,1.03eq；cas#1207961-50-9)、6-碘-4-甲基-3-甲基硫烷基-1,2,4-三嗪-5-酮中間體2(295.0mg,1.04mmol,1.0eq)、k2co3(430.0mg,3.11mmol,2.99eq)和pd-170(140.0mg,0.21mmol,0.2eq)在mecn(12ml)和水(3ml)中的溶液用n2脫氣5分鐘，隨后加熱至60℃持續(xù)20小時。將反應冷卻，濃縮并裝載到硅藻土上。將粗產物通過柱色譜法在c18硅膠上純化(40g柱，10-100％[0.1％甲酸mecn:0.1％甲酸水溶液]，以得到標題化合物(132.0mg,39％收率)，其為淡黃色固體。lcmsm/z?298.1/300.1[m+h]+esipos。

419、步驟b：6-(4-氯-2-羥基-6-甲基-苯基)-3-[[(3r)-1-乙基-3-哌啶基]氨基]-4-甲基-1,2,4-三嗪-5-酮

420、將含有6-(4-氯-2-羥基-6-甲基-苯基)-4-甲基-3-甲基硫烷基-1,2,4-三嗪-5-酮(65.0mg,0.22mmol,1.0eq)和(3r)-1-乙基哌啶-3-胺(121.0mg,0.94mmol,4.32eq)的mw小瓶在180℃輻射0.5小時，其中觀察到幾乎完全的轉化。將反應混合物濃縮至干，隨后裝載到硅藻土上。隨后將粗品通過反相快速柱色譜法純化(c18?13g柱，10-100％?mecn/10mmnh4hco3水溶液)，以得到標題化合物(35.0mg，40％收率)，其為淺黃色固體。lcmsm/z?378.3/380.2[m+h]+,esipos。

421、實例a

422、式i化合物可以以本身已知的方式用作生產以下組成的片劑的活性成分：

423、

424、

425、實例b

426、式i化合物可以以本身已知的方式用作生產以下組成的膠囊的活性成分：

427、