本發明涉及生物醫學領域，具體涉及一種tead家族轉錄因子基因或含其的載體在制備治療神經損傷的藥物中的用途。
背景技術：
1、脊髓損傷（sci）是一種嚴重的神經系統疾病，主要由脊髓的物理創傷引起。根據病理生理過程，脊髓損傷可分為原發性損傷和繼發性損傷。在最初階段，脊髓的物理創傷會導致血脊髓屏障破壞，導致出血和水腫。缺血和再灌注導致病變中心神經元和膠質細胞壞死和凋亡、軸突變性和脫髓鞘，并引發包括炎癥反應在內的繼發性損傷。過度的炎癥反應和浸潤性白細胞的外滲從病變中心擴展到鄰近區域，導致細胞凋亡，加重組織損傷。損傷部位的小膠質細胞介導的神經炎癥反應也可能放大脊髓損傷的繼發性損傷。病變部位神經元壞死和凋亡以及軸突脫髓鞘和缺失導致永久性神經功能缺損。因此，損傷區的軸突再生、形成新的連接會有助于促進脊髓損傷后的功能恢復。
2、tead（transcriptional?enhanced?associate?domain）轉錄因子家族是一個由四個成員組成的轉錄因子家族，包括tead1、tead2、tead3和tead4，它們具有高度的結構和功能相似性。這些轉錄因子通過與其他蛋白質（尤其是yap/taz）相互作用，調控一系列基因的表達，進而影響細胞增殖、分化、遷移等過程。目前常用于抗腫瘤研究，但未有促進神經損傷修復的報道。
技術實現思路
1、本發明要解決的技術問題是提供tead家族轉錄因子基因或含其的載體的新用途，即在制備治療神經損傷的藥物中的用途。
2、本發明直接將tead家族的基因導入損傷部位細胞，通過病毒載體（如腺相關病毒（adeno-associated?virus,?aav）、慢病毒）等方式實現較長時間的基因表達，增強軸突再生及神經修復功能，為神經損傷修復提供了一種非侵入性、高效的基因治療途徑。相較于現有技術，該方法具有使用病毒量少、生產、運輸和保存成本低、操作簡單、靶向性強、免疫原性極小、不改變基因組、單次治療可持續時間長和副作用小等顯著優勢（例如：不會引發免疫反應及基因表達失控），有望廣泛應用于各種神經損傷的治療，包括創傷性腦損傷、脊髓損傷和神經退行性疾病等。
3、為此，本發明第一方面提供一種tead家族轉錄因子基因或含其的載體在制備治療神經損傷的藥物中的用途。
4、在一些實施方案中，所述載體包括表達或過表達tead家族轉錄因子基因的重組載體。
5、在一些優選實施方案中，所述重組載體的骨架選自pav-cmv-p2a-gfp、paav-u6-sgrna-cmv-gfp、pcmv-pe2-p2a-gfp、paav-cmv-nls-casrx-p2a-gfp、paav-ef1a-gfp和paav-cmv-gfp-p2a-puro中的任一種。
6、上述骨架載體都是現有常規的可用于表達基因的載體，可以根據不同的基因重組表達方式進行選擇。例如如果需要結合基因編輯工具，可以選擇paav-u6-sgrna-cmv-gfp或paav-cmv-nls-casrx-p2a-gfp；如果需要長期穩定表達，可以選擇paav-ef1a-gfp或paav-cmv-gfp-p2a-puro。顯然其中用于標記蛋白的gfp是為了檢測，藥物中不需要或者也可以替換成其他標記蛋白。
7、在一些實施方案中，所述載體還包括遞送載體，所述遞送載體優選自病毒載體例如為慢病毒載體、腺病毒載體、逆轉錄病毒載體或腺相關病毒載體等。所述病毒載體用于包裝和遞送基因，例如本發明上述含有tead基因的重組表達載體。
8、在一些優選實施方案中，所述病毒載體為腺相關病毒載體。
9、在一些更優選實施方案中，所述腺相關病毒載體為aav9，用于包裝和遞送載體。本發明對腺相關病毒（aav）的不同血清型進行了嚴格篩選。aav的血清型對其組織趨向性具有顯著影響，本發明人發現aav9血清型在神經組織中表現出優異的轉導效率和安全性，從而確保了本發明構建的過表達載體能夠有效地傳遞至神經細胞，實現目標基因的穩定表達。
10、在一些實施方案中，所述tead家族轉錄因子基因包含哺乳動物來源的tead家族轉錄因子基因。
11、在一些優選實施方案中，所述哺乳動物來源的tead家族轉錄因子基因為鼠源tead家族轉錄因子基因。
12、在一些實施方案中，所述鼠源tead家族轉錄因子基因包含tead1，tead2，tead3和tead4；tead1、tead2、tead3和tead4具有高度的同源性，在功能上具有一致性。
13、在本發明一實施方案中，以tead1作為所述tead家族轉錄因子基因的例子。
14、在本發明一優選實施方案中，所述tead1的氨基酸序列如seq?id?no:1所示；所述重組過表達載體選用常見且成本相對低的pav-cmv-p2a-gfp；并且所述病毒載體選用aav9。
15、本發明所述“神經損傷”是指神經結構（如軸突、髓鞘或神經束）或功能因機械、化學、生物等因素受損，導致感覺、運動或自主神經功能障礙的病理狀態，可由創傷（如切割傷、骨折）、代謝異常（如糖尿病）、感染（如腦膜炎）、中毒（重金屬或藥物）等引起。神經損傷可分為中樞神經損傷和周圍神經損傷。所述中樞神經損傷涉及腦和脊髓，如腦外傷、腦卒中或多發性硬化，常導致不可逆功能障礙；所述周圍神經損傷例如為臂叢神經損傷或糖尿病性神經病變。
16、在一些實施方案中，所述神經損傷包括急性損傷、慢性損傷、炎癥性損傷和缺血性損傷中的一種或多種；
17、和/或，所述神經損傷包括周圍神經損傷和中樞神經損傷。
18、在一些優選實施方案中，所述急性損傷為創傷性脊髓壓迫；所述慢性損傷為退行性脊柱疾病引起的脊髓損害；所述炎癥性損傷為多發性硬化或自身免疫疾病；所述缺血性損傷為脊髓供血不足引起的損傷；
19、和/或，所述中樞神經損傷包括腦神經損傷和脊髓神經損傷。
20、在一些實施方案中，所述載體促進內源性細胞分泌外泌體。
21、在一些實施方案中，所述內源性細胞為神經干細胞、膠質細胞、炎癥細胞和間充質干細胞中的至少一種。
22、在一些優選實施方案中，所述間充質干細胞為脊髓間充質干細胞。
23、在一些實施方案中，所述藥物為局部使用藥物。
24、在符合本領域常識的基礎上，上述各優選條件，可任意組合，即得本發明各較佳實例。
25、本發明所用試劑和原料均市售可得。
26、本發明的積極進步效果在于：
27、本方法發明具有使用病毒量少，生產、運輸和保存成本低，操作簡單，靶向性強，免疫原性極小，不改變基因組，單次治療可持續時間長等優點和更少的副作用（例如：不會引發免疫反應及基因表達失控），適用于廣泛的神經損傷治療。
1.一種tead家族轉錄因子基因或含其的載體在制備治療神經損傷的藥物中的用途。
2.如權利要求1所述的用途，其特征在于，所述載體包括重組載體，所述重組載體的骨架優選自pav-cmv-p2a-gfp、paav-u6-sgrna-cmv-gfp、pcmv-pe2-p2a-gfp、paav-cmv-nls-casrx-p2a-gfp、paav-ef1a-gfp和paav-cmv-gfp-p2a-puro中的任一種。
3.如權利要求1或2所述的用途，其特征在于，所述載體還包括遞送載體，所述遞送載體優選自病毒載體例如為慢病毒載體、腺病毒載體、逆轉錄病毒載體或腺相關病毒載體；
4.如權利要求1-3任一項所述的用途，其特征在于，所述tead家族轉錄因子基因包含哺乳動物來源的tead家族轉錄因子基因；
5.如權利要求4所述的用途，其特征在于，所述鼠源tead家族轉錄因子基因包含tead1，tead2，tead3和tead4；
6.如權利要求1所述的用途，其特征在于，所述tead家族轉錄因子基因為tead1，所述tead1的氨基酸序列如seq?id?no:?1所示；所述載體包括作為表達載體骨架的pav-cmv-p2a-gfp；以及病毒載體的aav9。
7.如權利要求1-6任一項所述的用途，其特征在于，所述神經損傷包括急性損傷、慢性損傷、炎癥性損傷和缺血性損傷中的一種或多種；
8.如權利要求1-7任一項所述的用途，其特征在于，所述載體促進內源性細胞分泌外泌體。
9.如權利要求8所述的用途，其特征在于，所述內源性細胞為神經干細胞、膠質細胞、炎癥細胞和間充質干細胞中的至少一種；
10.如權利要求1-9任一項所述的用途，其特征在于，所述藥物為局部使用藥物。