本發明屬于化學分析檢測，具體涉及一種基于mxene/mofs納米酶的比色和光熱雙模式檢測咖啡中丙烯酰胺的方法。
背景技術：
1、丙烯酰胺（acrylamide，am）是食品熱加工過程中產生的具有神經毒性的潛在致癌物質。咖啡作為世界三大飲品之一，具有降血糖血脂、神經保護等生物學功能。咖啡生豆在高溫焙炒階段發生美拉德、焦糖化等系列反應，產生的大量新化合物使咖啡具有了獨特的風味。然而，美拉德反應也是食品污染物-丙烯酰胺形成的主要途徑。咖啡因在全球范圍內的人均日攝入量過高，成為丙烯酰胺的高貢獻食品之一。因此，如何有效采取措施降低咖啡飲品中丙烯酰胺的質量分數成為全球關注的重點問題，而高靈敏準確定量檢測咖啡中丙烯酰胺是研究am形成機制和抑制作用的前提。目前，已采用hplc、lc-ms/ms、gc-ms等多種儀器分析方法檢測食品中的am含量。雖然有比色法、熒光法快速檢測am的報道，但由于咖啡基質復雜，尤其是提取液顏色較深，對測定干擾較大。
2、近年來，基于溫度信號讀出的光熱分析平臺因其簡單、方便以及在不同傳感領域的現場實用性而被廣泛研究。有趣的是，除了在紫外-可見光譜中用于比色分析外，tmb作為過氧化物酶的主要底物，氧化tmb（oxtmb）還在近紅外（nir）光譜中表現出吸收，并顯示出強烈的nir激光（808?nm）觸發的光轉換效率，用于高靈敏度的定量光熱檢測。
技術實現思路
1、本發明提供了一種基于mxene/mofs納米酶的比色和光熱雙模式檢測咖啡中丙烯酰胺的方法，本發明方法以lif和hcl刻蝕ti3alc2得到mxene，采用溶劑熱法合成出二維金屬-有機框架納米片mn/fe-mil(53)-nh2，再利用自組裝的方式制備得到復合納米材料mxene@mn/fe-mil-nh2，mxene@mn/fe-mil-nh2具有類過氧化物酶活性及光熱性能，在近紅外光808nm照射下，其類過氧化物酶活性得到提高，丙烯酰胺的加入，加速了mxene@mn/fe-mil-nh2氧化底物tmb的速度，同時作為具有光敏性能的氧化型tmb的溫度也得到提高，由此建立了丙烯酰胺的比色與溫度傳感的高靈敏、選擇性強檢測新方法，檢出限分別為0.03μg/ml及0.01μg/ml，尤其作為一種有效溫度傳感，能顯著消除咖啡基質帶來的干擾。方法具有靈敏度高、特異性強、操作簡單、快速等特點。
2、本發明基于mxene/mofs納米酶的比色和光熱雙模式檢測咖啡中丙烯酰胺的方法如下：
3、（1）將1-2g?lif和20-40?ml9?mol/l?hcl加入聚四氟燒杯中，在400-600rpm下攪拌1-1.5h后，緩緩加入1-2g的ti3alc2，加入混勻后，在溫度35℃下并持續攪拌48h，在3500-4000?rpm下離心10-15?min，用純凈水洗至ph?5左右，冷凍干燥后即得mxene；
4、（2）將2-3mmol的fecl3·6h2o與4-6mmol的mn(ch3coo)2·4h2o溶解于20-40ml?dmf中，記為a液；同時將2-3mmol的nh2-bdc（2-氨基對苯二甲酸）溶解在另一20-40ml?dmf中，記為b液；隨后，緩慢將a液加入b液中，攪拌混勻，將混合溶液放入特氟龍高壓釜，在120-140℃加熱8-10h，自然冷卻后，在6000-8000rpm離心5-10min，得到淡棕色沉淀，沉淀用dmf和無水乙醇各洗滌3-4次，在6000-8000rpm離心5-10min，將收集到的產物在80℃下干燥12-24h，獲得mn/fe-mil-nh2；
5、（3）按質量比為1:3-4的比例，將mxene和mn/fe-mil-nh2混合，并分散于50-80ml純水中，在室溫下攪拌6-8h，得到mxene@mn/fe-mil-nh2納米酶；
6、（4）分別在不同梯度濃度的丙烯酰胺（am）溶液中加入mxene@mn/fe-mil-nh2納米酶溶液，然后加入3,3',5,5'-四甲基聯苯胺（tmb）及h2o2，生成藍色氧化產物，用ph?7.0磷酸鹽緩沖溶液定容至3ml，搖勻，靜置5-10min，有654nm波長處測定吸光度，確定am濃度與吸光度值的線性關系，獲得回歸方程；
7、（5）分別在不同梯度濃度的丙烯酰胺溶液中加入mxene@mn/fe-mil-nh2納米酶溶液，然后加入3,3',5,5'-四甲基聯苯胺（tmb）及h2o2，生成藍色氧化產物，用ph?7.0磷酸鹽緩沖溶液定容至3ml，搖勻，反應溶液在808nm?nir激光照射4-6min后，立即使用便攜式筆式數字溫度計記錄溫度并計算溫度變化值δt，確定am濃度與溫度變化值δt的線性關系，獲得回歸方程，其中δt?=?t-t0，t和t0分別為反應溶液在激光照射后和照射前的溫度；
8、（6）待測樣品液按照步驟（4）和步驟（5）操作，測定吸光度值和溫度變化值δt，代入回歸方程，獲得待測樣品液中丙烯酰胺含量。
9、所述mxene@mn/fe-mil-nh2溶液濃度為30μg/ml，添加量為50-100μl，tmb濃度為0.2mmol/l，添加量為50-100μl，h2o2濃度為2mmol/l，添加量為50-100μl，808nm?nir的功率為1.5-2.0?w/cm2。
10、本發明的優點在于：
11、1、本發明合成有優異的光熱轉換性能的mxene、具有許多可觸及的活性位點、介孔/大孔隙率和更快的電子轉移的二維金屬-有機框架納米片mn/fe-mil-nh2，以自組裝的方式制備得到復合納米材料mxene@mn/fe-mil-nh2，通過電子傳遞過程和產生·?oh的協同作用，?mxene@mn/fe-mil-nh2在中性條件下表現出優異的類過氧化物酶活性及光熱性能，重要的是，丙烯酰胺通過與mxene@mn/fe-mil-nh2特異結合表現出特異性的響應，隨后增強了內在的類過氧化物酶活性，為簡單、快速、特異、靈敏和無背景的光熱檢測丙烯酰胺提供了一種有前途的替代方法；
12、2、由于丙烯酰胺增加了納米酶過氧化物酶活性，而808nm?nir激光照射進一步增加類過氧化物酶活性，使檢測體系有更大的吸光度及溫度差值，實現了丙烯酰胺高靈敏雙模式檢測，檢出限分別為0.03μg/ml及0.01μg/ml，尤其咖啡中丙烯酰胺光熱檢測的加標回收率達92.33％～100.34％，體系檢測準確性較高。
1.一種基于mxene/mofs納米酶的比色和光熱雙模式檢測咖啡中丙烯酰胺的方法，其特征在于，步驟如下：
2.根據權利要求1所述的方法，其特征在于：mxene@mn/fe-mil-nh2溶液濃度為30μg/ml，添加量為50-100μl，3,3',5,5'-四甲基聯苯胺濃度為0.2mmol/l，添加量為50-100μl，h2o2濃度為2mmol/l，添加量為50-100μl，808nm?nir的功率為1.5-2.0?w/cm2。