本發明涉及醫藥領域，具體涉及鬼吹簫藥材指紋圖譜、構建方法及檢測方法。
背景技術：
1、鬼吹簫(leycesteria?formosa?wall.)為忍冬科(caprifoliaceae)鬼吹簫屬(leycesteria)落葉灌木或小灌木植物。全世界約8種，分布于喜馬拉雅地區和緬甸，我國有6種，云南有4種，是該屬植物的主要分布地區，除滇南外，幾乎遍布于全省各地。鬼吹簫又名風吹簫、火炮筒、鬼炮仗、空心木等，在云南分布廣泛，生于海拔1400～3300m的大部分地區，資源豐富，為多種民族常用藥用植物，白族稱作“需改”、“厚雙柱”，彝族稱作“乃替沒”，具有破血調經、祛風除濕、化痰平喘、利水消腫的功效，主要用于治療膀胱炎、水腫、支氣管哮喘、食積、腹脹、風濕痛、痔瘡等，外用可治療骨折，葉可作涼藥。
2、中藥特征圖譜是目前被廣泛接受的一種中藥質量評價模式，它的應用體現了中藥全面質量管理的趨勢，符合中藥質量控制整體表征分析的特點。目前，對于鬼吹簫藥材并沒有明確的質量標準體系，因此有必要建立鬼吹簫的特征圖譜或指紋圖譜對該藥材質量的一致性及穩定性進行評價，在其生產質控方面具有重大意義。
技術實現思路
1、為了克服上述技術缺陷，本發明提供了鬼吹簫藥材指紋圖譜、構建方法及檢測方法，為鬼吹簫藥材進行質量檢測和控制提供依據。
2、為了實現上述目的，本發明的技術方案為：
3、一方面，本發明提供一種鬼吹簫藥材指紋圖譜的構建方法，包括以下步驟：
4、s1.取綠原酸對照品配制成參照物溶液；
5、s2.提取鬼吹簫提取物配制試供品溶液：
6、s3.分別取所述供試品溶液和所述對照品溶液經高效液相色譜法測定，獲得鬼吹簫藥材指紋圖譜；
7、所述色譜條件為：色譜柱以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，以乙腈為流動相a，以0.1wt％磷酸溶液為流動相b，進行梯度洗脫，流速為0.5ml/min-1.5ml/min，柱溫為25℃-35℃，檢測波長為200～280nm。
8、進一步地，所述s1中，所述參照物溶液采用醇溶液溶解綠原酸對照品配制而成；
9、進一步地，所述s1中，所述醇溶液選自甲醇、乙醇、正丙醇、異丙醇、正丁醇、異丁醇溶液中的一種；
10、進一步地，所述s1中，所述醇溶液的濃度為50％-100％wt；
11、進一步地，所述s1中，所述參照物溶液濃度為200-300μg/ml；
12、進一步地，所述s2中，所述鬼吹簫提取物為鬼吹簫用提取溶劑提取得到；所述提取溶劑選自水、甲醇、乙醇、正丙醇、異丙醇、正丁醇、異丁醇、甲酸甲酯、甲酸乙酯、乙酸甲酯、乙酸乙酯、二氯甲烷、氯仿、四氯化碳、二氯乙烷、丙酮、丁酮、戊酮中的一種或多種。
13、進一步地，所述s2中，所述鬼吹簫提取物為鬼吹簫水提取物或鬼吹簫醇提取物。
14、進一步地，所述s2中，所述鬼吹簫提取物提取物采用以下步驟制得：取鬼吹簫藥材，粉碎，加入提取溶劑，超聲提取，定容，過濾，收集濾液。
15、進一步地，所述s2中，超聲提取頻率20-60khz；
16、和/或，超聲提取時間為30-90min。
17、進一步地，所述s3中，梯度洗脫條件為：
18、0-15min，流動相a的體積分數為10％，流動相b的體積分數為90％；
19、15-30min，流動相a的體積分數變化為10％-30％，流動相b的體積分數變化為90％-70％；
20、30-55min，流動相a的體積分數變化為30％-80％，流動相b的體積分數變化為70％-20％；
21、55-60min，流動相a的體積分數變化為80％-100％，流動相b的體積分數變化為20％-0％。
22、進一步地，所述s3中，所述供試品溶液呈現9個共有峰，其中，與對照品峰對應3號峰為參照峰，其它各共有峰與參照峰的相對保留時間rsd值范圍為0.01～0.38％，相對峰面積rsd值范圍為0.22～1.90％。
23、第二方面，本發明提供一種采用上述的方法構建的鬼吹簫藥材指紋圖譜，所述供試品溶液呈現9個共有峰，以3號峰綠原酸峰為參照峰，其它各共有峰與參照峰的相對保留時間rsd值范圍為0.01～0.38％，相對峰面積rsd值范圍為0.22～1.90％。
24、第三方面，本發明提供一種鬼吹簫藥材的檢測方法，將上述方法構建的鬼吹簫藥材指紋圖譜、上述的鬼吹簫藥材指紋圖譜與待測樣品的特征圖譜進行比較，綠原酸峰面積rsd值應在規定值的±5％之內為合格產品；和/或，將上述方法構建的鬼吹簫藥材指紋圖譜、上述的鬼吹簫藥材指紋圖譜與待測樣品的特征圖譜進行相似性評價，相似度大于0.90為合格產品。
25、有益效果：本發明以鬼吹簫藥材為研究對象，以乙腈-0.1％磷酸溶液為流動相，首次構建了鬼吹簫藥材指紋圖譜，共標定出9個共有峰，指認了特征成分綠原酸；本發明鬼吹簫指紋圖譜的構建方法通過優化提取時間、提取方法，使得鬼吹簫色譜峰的信息量最大程度暴露，檢測靈敏度高，具有較強的專屬性和良好的重現性及穩定性，準確度高，能快速高效的對鬼吹簫藥材進行質量控制。并通過對鬼吹簫藥材中綠原酸含量進行測定，更加全面、有效的控制鬼吹簫藥材的質量，確保療效和用藥安全。
1.一種鬼吹簫藥材指紋圖譜的構建方法，其特征在于，包括以下步驟：
2.根據權利要求1所述的鬼吹簫藥材指紋圖譜的構建方法，其特征在于，所述s1中，所述參照物溶液采用醇溶液溶解綠原酸對照品配制而成；
3.根據權利要求1所述的鬼吹簫藥材指紋圖譜的構建方法，其特征在于，所述s2中，所述鬼吹簫提取物為鬼吹簫用提取溶劑提取得到；所述提取溶劑選自水、甲醇、乙醇、正丙醇、異丙醇、正丁醇、異丁醇、甲酸甲酯、甲酸乙酯、乙酸甲酯、乙酸乙酯、二氯甲烷、氯仿、四氯化碳、二氯乙烷、丙酮、丁酮、戊酮中的一種或多種。
4.根據權利要求1所述的鬼吹簫藥材指紋圖譜的構建方法，其特征在于，所述s2中，所述鬼吹簫提取物為鬼吹簫水提取物或鬼吹簫醇提取物。
5.根據權利要求1所述的鬼吹簫藥材指紋圖譜的構建方法，其特征在于，所述s2中，所述鬼吹簫提取物采用以下步驟制得：取鬼吹簫藥材，粉碎，加入提取溶劑，超聲提取，定容，過濾，收集濾液。
6.根據權利要求5所述的鬼吹簫藥材指紋圖譜的構建方法，其特征在于，所述s2中，超聲提取頻率20-60khz；
7.根據權利要求1所述的鬼吹簫藥材指紋圖譜的構建方法，其特征在于，所述s3中，梯度洗脫條件為：
8.根據權利要求1-7任一項所述的鬼吹簫藥材指紋圖譜的構建方法，其特征在于，所述供試品溶液呈現9個共有峰，其中，與對照品峰對應3號峰為參照峰，其它各共有峰與參照峰的相對保留時間rsd值范圍為0.01～0.38％，相對峰面積rsd值范圍為0.22～1.90％。
9.一種采用權利要求1-7任一項所述的方法構建的鬼吹簫藥材指紋圖譜，其特征在于，所述供試品溶液呈現9個共有峰，以3號峰綠原酸峰為參照峰，其它各共有峰與參照峰的相對保留時間rsd值范圍為0.01～0.38％，相對峰面積rsd值范圍為0.22～1.90％。
10.一種鬼吹簫藥材的檢測方法，其特征在于，將權利要求1-8所述方法構建的鬼吹簫藥材指紋圖譜、權利要求9所述的鬼吹簫藥材指紋圖譜與待測樣品的特征圖譜進行比較，綠原酸峰面積rsd值應在規定值的±5％之內為合格產品；和/或，將權利要求1-8所述方法構建的鬼吹簫藥材指紋圖譜、權利要求9所述的鬼吹簫藥材指紋圖譜與待測樣品的特征圖譜進行相似性評價，相似度大于0.90為合格產品。