本發明屬于動物飼料，具體涉及一種靶向調控豬腸道羅伊氏乳桿菌的發酵飼料制備方法及其在畜禽生產中的應用。
背景技術：
1、生豬養殖業是關乎國計民生的重要產業，在我國占有非常重要的地位，豬肉是我國居民最主要的肉食品。但生豬養殖面臨嚴峻挑戰：非洲豬瘟疫情爆發以來，嚴重影響我國生豬養殖，在非洲豬瘟等生物安全下如何保障生豬健康尚無公認的最優方案；飼料全面禁抗后豬生長性能和免疫力降低，如何做到生豬綠色健康養殖；環保和綠色養殖壓力持續增大，如何改善生豬養分減排等等。
2、現有技術存在以下問題：
3、菌群調控不精準：傳統發酵飼料難以靶向促進特定益生菌（如羅伊氏乳桿菌）增殖，導致效果不穩定；
4、評估方法不足：缺乏快速、可靠的體外模型評估發酵飼料對腸道菌群的影響；
5、生產性能提升有限：發酵工藝未優化，抗營養因子降解不徹底，飼料利用率低。
6、公開專利cn111820329a提出了一種一種乳仔豬發酵飼料，但其菌種組合未針對羅伊氏乳桿菌調控，且未提供體外評估模型。因此，亟需一種能夠精準調控腸道菌群、提升生產性能的發酵飼料技術。
7、腸道微生態與豬的生長和健康息息相關，在提高消化吸收，機體免疫等方面具有重要作用。近年來一些研究發現，發酵飼料可以調節豬的腸道微生態，可預防腸道菌群失調引發的疾病，改善豬生產性能。一方面，發酵飼料可能作為潛在的益生元，促進腸道有益菌的生長；另一方面，發酵飼料也提供益生菌群，影響了腸道微生物。但是發酵飼料與豬腸道微生物的因果關聯性，以及如何精確調控等問題亟需解決。
技術實現思路
1、本發明的目的是提供一種發酵飼料制備方法及其應用，通過特定菌種組合及工藝優化，靶向促進豬腸道羅伊氏乳桿菌增殖，同時建立體外評估模型驗證其效果，實現飼料營養與動物健康的雙重提升。
2、為實現上述目的，本發明采用以下技術方案：
3、1、發酵飼料制備方法
4、原料配比：玉米、豆粕、黃酒糟按質量比4:4:2至4.5:4.5:1混合；優選的，原料按質量配比為玉米：豆粕：黃酒糟=4:4:2。
5、菌種添加：按發酵原料總質量的0.06%～0.10%添加乳酸片球菌（ pediococcus? acidilactici，保藏號cgmcc?no:?1.12332），按0.10%～0.12%添加地衣芽孢桿菌（ bacillus? licheniformis，保藏號cgmcc?no:?1.9048）；按0.1-0.2%添加復合酶，所述復合酶包括纖維素酶、半纖維素酶和木聚糖酶，按質量比1：1：1混合；優選的，復合酶還可以包括α-淀粉酶，其與所述纖維素酶、半纖維素酶和木聚糖酶，按質量比1：1：1：1混合；優選的，乳酸片球菌菌粉添加量為0.08%，地衣芽孢桿菌菌粉添加量為0.11%，復合酶添加量為0.15%。
6、發酵工藝：調節水分至35%～40%，30℃恒溫靜置發酵3天，至ph降至4.5以下，最終飼料中乳酸片球菌活菌數達4.7×108?cfu/g，地衣芽孢桿菌活菌數達5.3×108?cfu/g。
7、2、體外評估方法
8、取發酵飼料煮沸后與豬糞便樣本按1:1體積比混合；優選的，發酵飼料與糞便的混合比例為2.5?ml發酵飼料溶液與2.5?ml糞便懸液。
9、接種至無菌培養基（配方：蛋白胨2g/l、酵母粉2g/l、吐溫80?0.16g/l、nahco32g/l、nacl?0.1g/l、k2hpo40.04g/l、cacl20.01g/l、mgso40.01g/l、血紅素0.02g/l）；
10、37℃厭氧條件下以155?rpm振蕩培養12～14小時，檢測乳酸菌豐度及羅伊氏乳桿菌絕對含量。
11、3、生產應用
12、將發酵飼料按日糧總重的10%等質量替代玉米和豆粕，并添加1.0%～2.0%大豆油；
13、顯著提升母豬采食量（6.16?kg/d?vs.?5.76?kg/d）、降低背膘損失（1.28?mm?vs.2.11?mm），提高仔豬斷奶增重（4.33?kg?vs.?3.92?kg），并降低腹瀉率（1.05%?vs.?1.57%）。
14、本發明的有益效果在于：
15、1、營養提升：發酵后粗蛋白由27.38%增至28.27%，酸溶蛋白由3.57%增至12.52%，抗營養因子（如大豆球蛋白）降低85.3%（表1）；
16、2、菌群調控：發酵飼料組母豬糞便中羅伊氏乳桿菌絕對含量提升2.5倍，體外發酵液中乳酸菌豐度增加40%；
17、3、生產性能優化：母豬乳蛋白含量由4.38%提升至4.92%，乳脂含量由6.57%提升至7.31%，仔豬日增重提高3.58%（表3）。
1.一種靶向調控豬腸道羅伊氏乳桿菌的發酵飼料制備方法，其特征在于，包括以下步驟：
2.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，步驟a中所述原料按質量配比為玉米：豆粕：黃酒糟=4:4:2。
3.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，步驟b中所述乳酸片球菌菌粉添加量為0.08%，地衣芽孢桿菌菌粉添加量為0.11%，復合酶添加量為0.15%。
4.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，步驟b中所述復合酶還可以包括α-淀粉酶，其與所述纖維素酶、半纖維素酶和木聚糖酶，按質量比1：1：1：1混合。
5.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，步驟c中所述發酵飼料的ph降至4.5時終止發酵，飼料中乳酸片球菌活菌數達4.7×108?cfu/g，地衣芽孢桿菌活菌數達5.3×108?cfu/g。
6.一種體外厭氧發酵評估發酵飼料對豬腸道菌群影響的方法，其特征在于，包括以下步驟：i.取權利要求1制備的發酵飼料煮沸后與豬糞便樣本混合；ii.接種至無菌培養基中，所述培養基包含蛋白胨2g/l、酵母粉2g/l、吐溫80?0.16g/l、nahco3?2g/l、nacl?0.1g/l、k2hpo4?0.04g/l、cacl2?0.01g/l、mgso4?0.01g/l、血紅素0.02g/l；iii在37℃厭氧條件下以155?rpm振蕩培養12～14小時；iv檢測發酵液中乳酸菌豐度及羅伊氏乳桿菌絕對含量。
7.根據權利要求6所述的方法，其特征在于，步驟i中所述發酵飼料與糞便的混合比例為2.5?ml發酵飼料溶液與2.5?ml糞便懸液。
8.一種權利要求1-5任一所述發酵飼料在畜禽生產中的應用，其特征在于，將權利要求1所述發酵飼料按日糧總重的10%等質量替代玉米和豆粕，并添加1.0%～2.0%的大豆油。