本發明涉及一種提高云龍石斑魚受精卵孵化率的方法，屬于養魚。

背景技術：

1、云龍石斑魚是一種具有生長優勢的養殖雜交新品種，其母本為云紋石斑魚，父本為鞍帶石斑魚，兩者均屬于鱸形目（perciformes）、鮨科（serranidae）、石斑魚屬（ epinephelus）。云龍石斑魚集成了親本的優良特性，具備生長速度快、畸形率低、耐寒性強、肉質鮮嫩等顯著特點。

2、然而，近年來，云龍石斑魚的繁殖面臨以下技術難題：其受精卵孵化率低且極不穩定，通常在5%至85%之間波動，嚴重影響了仔魚的產量，導致苗種產量無法實現大規模生產，從而嚴重制約了云龍石斑魚的產業化發展。

3、在養殖環境中，由于鞍帶石斑魚需達到20-30kg以上體重才能性成熟，且雄性個體稀少，占比僅約10%，使得鞍帶石斑魚的精子獲取較為困難。經過多年的生產實踐和研究發現，云龍石斑魚的父本鞍帶石斑魚（龍膽石斑魚）的精子質量直接影響了雜交后代受精卵的孵化率。

技術實現思路

1、本發明提供了一種提高云龍石斑魚受精卵孵化率的方法，可以有效解決上述問題。

2、本發明提供一種提高云龍石斑魚受精卵孵化率的方法，包括以下步驟：

3、s1，親本培育與雄性轉化：選取5齡且無精液的鞍帶石斑魚作為父本進行室內循環水培育，在培育過程中采用投喂含有甲基睪酮的飼料、注射促卵泡激素以及周期性升降水溫的協同方式誘導雄性轉化；

4、s2，雄魚篩選：定期檢查步驟s1中親本中的雄性轉化率，篩選雄魚成熟度合格的雄魚；再在雄魚成熟度合格的雄魚中篩選精子成熟度合格的雄魚；最后，采集精子成熟度合格的雄魚的精液，進行云紋石斑魚的卵子的人工授精，篩選出受精率大于等于85.6%和孵化率大于等于78.2%的雄魚；

5、s3，授精孵化：采集步驟s2中篩選出的雄魚的精液，用于云紋石斑魚的卵子的人工授精，進行受精卵孵化。

6、步驟s1中，所述周期性升降水溫方式為：每10天為一個周期，周期開始時水溫為25-27℃，隨后每天升高0.5-1.5℃，至第5天后升至30-32℃，之后每天降低0.5-1.5℃，至第10天降回25-27℃。該周期性升降水溫方式能夠提高雄性轉化率的原理推論為：周期性的溫度脅迫可能加速了魚體的基礎代謝率，從而促進了外源激素（甲基睪酮）的吸收與代謝；同時，特定范圍的溫差刺激可能激活了魚體性腺發育軸（hpg軸）中相關基因的表達，協同外源激素加速了精巢的發育。

7、步驟s1中，所述飼料為藍圓鰺或巴浪魚，兩天投喂1次飼料，每次投喂量為魚體重的0.5-1.5％；甲基睪酮在飼料中的添加量為30～60?mg/kg魚體重；所述促卵泡激素采用肌肉注射方式，每10天注射一次，注射量為0.5μg/kg魚體重。

8、在一些實施例中，步驟s1中，所述室內循環水培育的條件還包括：水流速度控制在0.3-0.5m/s，培育溫度范圍控制在26～31℃，鹽度27～33，ph值為7.7～8.0，溶解氧≥5mg/l，氨氮<0.1mg/l。

9、在一些實施例中，步驟s1中，所述周期性升降水溫方式具體為：每10天為一個周期，周期開始時水溫為26℃，隨后每天升高1℃，至第5天后升至31℃，之后每天降低1℃，至第10天降回26℃。

10、在一些實施例中，步驟s2中，所述雄魚成熟度合格的判斷標準為：輕壓雄魚腹部靠近生殖孔的部位時，精液流出量大于0.1ml為合格；精子成熟度合格的判斷標準為：精液經海水激活15秒鐘內，有70%以上精子處于運動狀態。

11、在一些實施例中，步驟s3中，所述受精卵孵化的條件為：受精卵密度為10-15g/t水體，孵化光照強度為100-120?lx，光照周期為9l：15d。

12、本發明的有益效果是：

13、本發明采用甲基睪酮促進雌雄性轉換，協同周期性升降溫方式，雄性率可達90%以上，解決自然群體或養殖群體中雄魚極少的問題，為后續高質量的精液的篩選提供基礎。

14、本發明通過篩選鞍帶石斑魚雄魚高質量精液，使云龍石斑魚的受精卵的孵化率穩定在80%以上。為云龍石斑魚的規模化發育奠定基礎。

1.一種提高云龍石斑魚受精卵孵化率的方法，其特征在于，包括以下步驟：

2.根據權利要求1所述的一種提高云龍石斑魚受精卵孵化率的方法，其特征在于，步驟s1中，所述室內循環水培育的條件還包括：水流速度控制在0.3-0.5m/s，培育溫度范圍控制在26～31℃，鹽度27～33，ph值為7.7～8.0，溶解氧≥5mg/l，氨氮<0.1mg/l。

3.根據權利要求1所述的一種提高云龍石斑魚受精卵孵化率的方法，其特征在于，步驟s1中，所述周期性升降水溫方式具體為：每10天為一個周期，周期開始時水溫為26℃，隨后每天升高1℃，至第5天后升至31℃，之后每天降低1℃，至第10天降回26℃。

4.根據權利要求1所述的一種提高云龍石斑魚受精卵孵化率的方法，其特征在于，步驟s2中，所述雄魚成熟度合格的判斷標準為：輕壓雄魚腹部靠近生殖孔的部位時，精液流出量大于0.1ml為合格；精子成熟度合格的判斷標準為：精液經海水激活15秒鐘內，有70%以上精子處于運動狀態。

5.根據權利要求1所述的一種提高云龍石斑魚受精卵孵化率的方法，其特征在于，步驟s3中，所述受精卵孵化的條件為：受精卵密度為10-15g/t水體，孵化光照強度為100-120lx，光照周期為9l：15d。