本發(fā)明屬于多糖及其應(yīng)用，涉及一種酸棗果肉多糖及其制備方法和應(yīng)用。
背景技術(shù)：
1、多糖(polysaccharide)，是由糖苷鍵結(jié)合的糖鏈，至少要超過10個的單糖組成的聚合糖高分子碳水化合物，多糖類化合物廣泛存在于動物細胞膜和植物、微生物的細胞壁中，植物多糖具有免疫調(diào)節(jié)功能、抗腫瘤、抗癌、降血糖、抗衰老、抗?jié)兊榷喾N作用。
2、酸棗(ziziphus?jujuba?var.spinosa(bunge)hu?ex?h.f.chow.)，鼠李科棗屬木本植物。酸棗性平、味甘酸，常食可健脾開胃，有養(yǎng)心安神、斂汗的功效，主治虛煩不眠、體虛多汗、津虛口渴等癥；由于酸棗仁主要含三萜皂苷類、黃酮類、三萜類、生物堿類，此外還含有脂肪油、蛋白質(zhì)、甾醇及微量具刺激性的揮發(fā)油，這些成分能抑制中樞神經(jīng)系統(tǒng)，呈現(xiàn)鎮(zhèn)靜、催眠作用，所以現(xiàn)有技術(shù)中大多從酸棗仁中提取多糖。但是研究發(fā)現(xiàn)，酸棗果肉中富含維生素c、膳食纖維等營養(yǎng)物質(zhì)，具有一定的營養(yǎng)價值，從酸棗果肉中提取酸棗果肉多糖是目前研究的重大課題。
3、現(xiàn)有針對酸棗果肉多糖的分離純化報道較少，屬于技術(shù)空白；雖然已公開的分離純化方法能實現(xiàn)植物多糖的純化，但是分離純化流程復(fù)雜，導(dǎo)致酸棗果肉多糖的純化效率低、回收率下降；而且當多糖為雜多糖(含半乳糖醛酸、阿拉伯糖等)時，現(xiàn)有分離純化方法存在分子量分布寬(如10-500kda)，多分散系數(shù)大的問題，從而使得多糖的均一性較差，進而導(dǎo)致其生物相容性差，限制多糖的應(yīng)用性能。
技術(shù)實現(xiàn)思路
1、針對現(xiàn)有酸棗果肉多糖存在均一性較差，生物相容性差以及性能受限的技術(shù)問題，本發(fā)明提供一種酸棗果肉多糖及其制備方法和應(yīng)用。
2、本發(fā)明的酸棗果肉多糖，結(jié)構(gòu)復(fù)雜、均一性好，具有優(yōu)異的生物相容性，能起到很好的降糖作用。
3、為了實現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采用的技術(shù)方案是：
4、一種酸棗果肉多糖，所述酸棗果肉多糖的主鏈結(jié)構(gòu)由→4)-α-d-galpa-(1→和→2,4)-α-l-rhap-(1→兩種糖殘基單元交替連接構(gòu)成；所述酸棗果肉多糖的支鏈主要由α-d-galp-(1→和→2)-α-l-rhap-(1→組成，且支鏈通過o-4位點與主鏈中的→2,4)-α-l-rhap-(1→糖殘基相連。
5、進一步限定，酸棗果肉多糖的重均分子量為35.991kda，數(shù)均分子量為29.593kda，z均分子量為44.295kda，分散系數(shù)為1.216，分子半徑為4.505nm。
6、進一步限定，所述酸棗果肉多糖的化學(xué)組成中，主要包含鼠李糖、阿拉伯糖、半乳糖、葡萄糖及半乳糖醛酸這五種單糖組分。
7、所述的酸棗果肉多糖的制備方法，包括以下步驟：
8、s1、酸棗果肉預(yù)處理
9、對酸棗依次進行干燥、粉碎、過篩和加熱回流預(yù)處理，得到酸棗果肉粉；
10、s2、脫蛋白、醇沉
11、采用sevag試劑對酸棗果肉粉進行脫蛋白，然后進行醇沉透析得到酸棗果肉粗多糖；
12、s3、分離純化
13、采用離子交換層析技術(shù)對酸棗果肉多糖粗品進行分離純化，得到酸棗果肉多糖。
14、進一步限定，所述步驟s1中，干燥是在60℃～70℃下烘烤20h～24h；過80目篩；加熱回流是采用乙醇加熱回流1.5h～2h。
15、進一步限定，所述步驟s2的具體步驟為：
16、酸棗果肉粉與水按質(zhì)量比1∶50混合，在80℃～100℃下加熱1h～3h，收集濾液；然后用sevag試劑脫蛋白質(zhì)；
17、將脫除蛋白質(zhì)后的產(chǎn)物進行離心，收集上清液，并與無水乙醇按體積比1∶4在4℃下混合，靜置過夜；經(jīng)乙醇沉淀后，再采用透析袋透析2～3天后，并經(jīng)冷凍干燥得到酸棗果肉粗多糖；所述透析袋的分子截留量為3500da。
18、進一步限定，所述步驟s3中，先使用deae?sepharose?a-25纖維素交換層析柱，利用洗脫液進行洗脫分離；并經(jīng)透析、干燥得到酸棗果肉多糖干粉；所述洗脫液為水或nacl溶液；
19、再用0.1mol/l的nacl溶液對酸棗果肉多糖干粉進行洗脫，并經(jīng)進行濃縮、干燥得到目標產(chǎn)物，即酸棗果肉多糖。
20、所述的酸棗果肉多糖在制備改善高血糖藥物中的應(yīng)用。
21、所述的酸棗果肉多糖在制備改善胰島素抵抗藥物中的應(yīng)用。
22、與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明的有益效果是：
23、1、本發(fā)明提供一種酸棗果肉多糖，主鏈結(jié)構(gòu)由→4)-α-d-galpa-(1→和→2,4)-α-l-rhap-(1→兩種糖殘基單元交替連接構(gòu)成；所述酸棗果肉多糖的支鏈主要由α-d-galp-(1→和→2)-α-l-rhap-(1→組成，且支鏈通過o-4位點與主鏈中的→2,4)-α-l-rhap-(1→糖殘基相連。表明酸棗果肉多糖的結(jié)構(gòu)復(fù)雜、均一性好，具有優(yōu)異的生物相容性，能起到很好的降糖作用。
24、2、本發(fā)明對酸棗進行預(yù)處理、脫蛋白、醇沉和分離純化得到酸棗果肉多糖；分離純化效率高，提高酸棗果肉多糖的回收效率和純度，均一性好；同時，制備方法簡單可行，能實現(xiàn)酸棗果肉多糖的工業(yè)化生產(chǎn)。
25、3、本發(fā)明通過研究發(fā)現(xiàn)，酸棗果肉多糖對胰島素抵抗的調(diào)節(jié)作用，采用酸棗果肉多糖進行干預(yù)能有效改善t2md小鼠的高血糖水平和胰島素抵抗水平，使得t2dm小鼠血糖水平得到了控制，起到降糖作用，能用于糖尿病的治療。
26、4、本發(fā)明通過研究發(fā)現(xiàn)，酸棗果肉多糖具有顯著的調(diào)節(jié)血脂作用，對hfd/stz誘導(dǎo)的糖尿病小鼠的血脂代謝紊亂具有較好的改善效果；酸棗果肉多糖能有效改善hfd/stz誘導(dǎo)的t2dm小鼠的胰腺損傷和結(jié)腸結(jié)構(gòu)損傷，從而對降糖效果的提升起到輔助作用。
1.一種酸棗果肉多糖，其特征在于，所述酸棗果肉多糖的主鏈結(jié)構(gòu)由→4)-α-d-galpa-(1→和→2,4)-α-l-rhap-(1→兩種糖殘基交替連接構(gòu)成；所述酸棗果肉多糖的支鏈主要由α-d-galp-(1→和→2)-α-l-rhap-(1→組成，且支鏈通過o-4位點與主鏈中的→2,4)-α-l-rhap-(1→糖殘基相連。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的酸棗果肉多糖，其特征在于，所述酸棗果肉多糖的重均分子量為35.991kda，數(shù)均分子量為29.593kda，z均分子量為44.295kda，分散系數(shù)為1.216，分子半徑為4.505nm。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的酸棗果肉多糖，其特征在于，所述酸棗果肉多糖的化學(xué)組成中，主要包含鼠李糖、阿拉伯糖、半乳糖、葡萄糖及半乳糖醛酸這五種單糖組分。
4.如權(quán)利要求1-3任一項所述的酸棗果肉多糖的制備方法，其特征在于，制備方法包括以下步驟：
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的制備方法，其特征在于，所述步驟s1中，干燥是在60℃～70℃下烘烤20h～24h；過80目篩；加熱回流是采用乙醇加熱回流1.5h～2h。
6.根據(jù)權(quán)利要求4所述的制備方法，其特征在于，所述步驟s2的具體步驟為：
7.根據(jù)權(quán)利要求4所述的制備方法，其特征在于，所述步驟s3中，先使用deaesepharose?a-25纖維素交換層析柱，利用洗脫液進行洗脫分離；并經(jīng)透析、干燥得到酸棗果肉多糖干粉；所述洗脫液為水或nacl溶液；
8.如權(quán)利要求1-3任一項所述的酸棗果肉多糖在制備改善高血糖藥物中的應(yīng)用。
9.如權(quán)利要求1-3任一項所述的酸棗果肉多糖在制備改善胰島素抵抗藥物中的應(yīng)用。