本發(fā)明涉及生物，具體涉及一種飲食誘導(dǎo)的小鼠動(dòng)脈粥樣硬化造模方法。
背景技術(shù)：
1、動(dòng)脈粥樣硬化是冠心病、中風(fēng)等心血管疾病的主要病理基礎(chǔ)。apoe-/-小鼠作為研究動(dòng)脈粥樣硬化的經(jīng)典模型，通常依靠單純高脂飲食誘導(dǎo)斑塊形成，但該方法需要較長(zhǎng)的誘導(dǎo)時(shí)間，大約12周才能完成，所耗費(fèi)的時(shí)間和物力成本比較高。近年來(lái)，已有研究嘗試使用不同的飲食干預(yù)來(lái)加速模型的建立，但多數(shù)干預(yù)效果和機(jī)制尚不明確。
2、由此，亟需提供一種干預(yù)效果和機(jī)制明確、步驟簡(jiǎn)單、有效且重復(fù)性良好的造模方法，為動(dòng)脈粥樣硬化及相關(guān)干預(yù)研究提供更為理想的動(dòng)物模型。
技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路
1、有鑒于此，本發(fā)明要解決的技術(shù)問(wèn)題在于提供一種飲食誘導(dǎo)的小鼠動(dòng)脈粥樣硬化造模方法。
2、本發(fā)明提供了一種飲食誘導(dǎo)的小鼠動(dòng)脈粥樣硬化造模方法，其采用載脂蛋白e基因敲除(apoe-/-)小鼠作為實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，通過(guò)聯(lián)合給予高脂飲食和飲水中添加食品級(jí)三氯蔗糖來(lái)加速動(dòng)脈粥樣硬化斑塊的形成；所述三氯蔗糖在飲水中的濃度為2％～3％w/v。
3、進(jìn)一步的，
4、所述apoe-/-小鼠造模步驟為8周齡雄性小鼠，經(jīng)過(guò)1周適應(yīng)期后分組試驗(yàn)，其中對(duì)照組給予常規(guī)高脂飲食和純凈飲水，實(shí)驗(yàn)組在相同高脂飲食條件下給予含有三氯蔗糖的飲水。
5、所述apoe-/-小鼠造模干預(yù)周期為6～8周。
6、所述高脂飲食中脂肪含量為15％，膽固醇含量為5％。
7、本發(fā)明提供了所述的一種飲食誘導(dǎo)的小鼠動(dòng)脈粥樣硬化造模方法在制備研究動(dòng)脈粥樣硬化與易損斑塊的模型中的應(yīng)用。
8、本發(fā)明的目的是提供一種飲食誘導(dǎo)的小鼠動(dòng)脈粥樣硬化造模方法，該方法僅通過(guò)在apoe-/-小鼠飲水中添加食品級(jí)三氯蔗糖，同時(shí)聯(lián)合高脂飲食，即可增加小鼠的脂質(zhì)代謝壓力，加速動(dòng)脈粥樣硬化斑塊的形成，從而解決傳統(tǒng)單純高脂飲食誘導(dǎo)模型所需時(shí)間長(zhǎng)、結(jié)果不穩(wěn)定的問(wèn)題。
9、為實(shí)現(xiàn)上述目的，具體的，本發(fā)明技術(shù)方案如下：
10、1.選擇8周齡雄性apoe-/-小鼠，經(jīng)1周適應(yīng)期后隨機(jī)分為實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組；
11、2.對(duì)照組給予高脂飲食(hfd)飼喂，同時(shí)飲用純凈水；
12、3.實(shí)驗(yàn)組在相同高脂飲食條件下，同時(shí)飲用添加有2％～3％w/v食品級(jí)三氯蔗糖的飲水；
13、4.干預(yù)周期為6～8周，期間定期記錄體重、攝食量、飲水量及血脂(如總膽固醇、甘油三酯、低密度脂蛋白膽固醇和高密度膽固醇)等指標(biāo)；
14、5.干預(yù)結(jié)束后，對(duì)小鼠主動(dòng)脈及肝臟進(jìn)行組織學(xué)檢測(cè)(包括he染色、油紅o染色和馬森染色)，并利用圖像分析軟件定量評(píng)估斑塊面積、成分及穩(wěn)定性。
15、與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明的有益效果：
16、1.加速造模：僅在飲水中添加三氯蔗糖這一簡(jiǎn)單飲食因素，即可在高脂飲食的基礎(chǔ)上顯著縮短動(dòng)脈粥樣硬化斑塊形成時(shí)間，實(shí)驗(yàn)周期縮短至6～8周；
17、2.模型穩(wěn)定：通過(guò)確定的三氯蔗糖濃度和干預(yù)時(shí)間，確保不同批次小鼠之間的造模結(jié)果一致性較高；
18、3.操作簡(jiǎn)便：相較于需要手術(shù)或復(fù)雜基因操作的造模方法，本方法操作簡(jiǎn)便，易于普及應(yīng)用；
19、4.研究意義：本發(fā)明公開(kāi)了一種全新的飲食誘導(dǎo)造模方法，進(jìn)一步豐富了利用飲食因素調(diào)控脂質(zhì)代謝和動(dòng)脈粥樣硬化進(jìn)程的研究手段，為后續(xù)藥物篩選及作用機(jī)制研究提供理想模型。
20、本專(zhuān)利技術(shù)通過(guò)在小鼠飲水中添加人工甜味劑三氯蔗糖，聯(lián)合高脂飲食條件對(duì)動(dòng)脈粥樣硬化具有促進(jìn)作用，且在文獻(xiàn)和公開(kāi)專(zhuān)利中尚未發(fā)現(xiàn)將食品級(jí)三氯蔗糖用于apoe-/-小鼠造模的報(bào)道。
1.一種飲食誘導(dǎo)的小鼠動(dòng)脈粥樣硬化造模方法，其特征在于，采用載脂蛋白e基因敲除(apoe-/-)小鼠作為實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，通過(guò)聯(lián)合給予高脂飲食和飲水中添加食品級(jí)三氯蔗糖來(lái)加速動(dòng)脈粥樣硬化斑塊的形成；所述三氯蔗糖在飲水中的濃度為2％～3％w/v。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，所述apoe-/-小鼠造模步驟為8周齡雄性小鼠，經(jīng)過(guò)1周適應(yīng)期后分組試驗(yàn)，其中對(duì)照組給予常規(guī)高脂飲食和純凈飲水，實(shí)驗(yàn)組在相同高脂飲食條件下給予含有三氯蔗糖的飲水。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的步驟，其特征在于，所述apoe-/-小鼠造模干預(yù)周期為6～8周。
4.根據(jù)權(quán)利要求2所述的步驟，其特征在于，所述高脂飲食中脂肪含量為15％，膽固醇含量為5％。
5.權(quán)利要求1或2所述的一種飲食誘導(dǎo)的小鼠動(dòng)脈粥樣硬化造模方法在制備研究動(dòng)脈粥樣硬化與易損斑塊的模型中的應(yīng)用。